[发明专利]一种视网膜内和/或视网膜下纤维化动物模型的构建方法

说明书

本发明公开了一种视网膜内和/或视网膜下纤维化动物模型的构建方法，它是向非人灵长类动物的眼部给予重组腺病毒AAV‑VEGF得到动物模型。本发明选择非人灵长类恒河猴，通过眼局部给予AAV‑VEGF得到的动物模型可以同时模拟nAMD的长期CNV和SRF，并且在短时间内就能得到能够长期模拟nAMD的晚期表型SRF。

技术领域

本发明具体涉及一种视网膜内和/或视网膜下纤维化动物模型的构建方法。

背景技术

年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration，AMD)是导致发达地区50岁以上人群不可逆性盲的首要病因。中国由于人口老龄化日趋严重，AMD也已成为重要的致盲性眼病。由于发病机制不清，一直是眼科临床工作的重点及难点。AMD根据临床病理特征分为干性(萎缩性)和湿性(nAMD)两类，而SRF(视网膜下纤维化，又称为黄斑盘状变性)被认为是湿性AMD的晚期阶段，是造成不可逆性视力受损的主要原因及nAMD抗VEGF(抗血管内皮生长因子)治疗的重要瓶颈。因此，迫切需要研究SRF发病机制，以期阻止nAMD进展以指导有效治疗。

目前已有运用大小鼠，兔，猪和猴等物种建立了能够模拟AMD部分重要的病理特征，但是仍未有任何动物模型可以重现人nAMD的所有表型。Ambati等于2003年报道了兼具类似干性AMD及湿性AMD(CNV)病理改变的基因敲除动物模型，即Ccl-2-/-和Ccr-2-/-小鼠模型，然而作为一种免疫缺陷动物，此类小鼠的存活率以及成模率不甚理想。也有多项研究利用激光诱导CNV啮齿动物模型来研究AMD晚期SRF的发病机制，但是首先，激光诱导的CNV持续时间较短(不超过1个月)并能自行恢复，不足与进行长期的药效学观察尤其是进行SRF的观察及研究；其次，不是所有激光诱导的CNV病灶都能够出现SRF；再者，解剖结构和人类相比，啮齿动物由于寿命短及眼球解剖差异大(眼球小，无黄斑区)等缺点，也不能真实反应AMD病人CNV和SRF特点。

由于nAMD病因复杂、病程长及临床病变多样，目前还没有任何动物模型可以重现人nAMD所有表型，尤其是早期和晚期nAMD病变都能够模拟的体内动物模型，并且纤维化的动物模型耗时均较长，这些都给建立该疾病动物模型带来了挑战。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种视网膜内和/或视网膜下纤维化动物模型的构建方法，它是向非人灵长类动物的眼部给予重组腺病毒AAV-VEGF得到动物模型。

进一步地，它是向非人灵长类动物眼部巩膜位置给予重组腺病毒AAV-VEGF得到动物模型。

进一步地，所述非人灵长类动物为新大陆猴或旧大陆猴，优选旧大陆猴。

更进一步地，所述旧大陆猴为猕猴，所述猕猴为恒河猴、熊猴、短尾猴、台湾岩猴或平顶猴，优选恒河猴。

进一步地，所述重组腺病毒AAV-VEGF的剂量为1.6*10⁷～1.6*10⁹μg/眼。

本发明还提供了一种视网膜内和/或视网膜下纤维化动物模型，它是眼部被给予重组腺病毒AAV-VEGF的非人灵长类动物。

进一步地，它是眼部巩膜下的脉络膜上腔位置被给予重组腺病毒AAV-VEGF的非人灵长类动物。

进一步地，所述非人灵长类动物是旧大陆猴；所述旧大陆猴为猕猴。

进一步地，所述猕猴为恒河猴、熊猴、短尾猴、台湾岩猴或平顶猴，优选恒河猴。

本发明还提供了一种前述方法构建的动物模型在筛选治疗视网膜内和/或视网膜下纤维化的药物中的应用。

本发明还提供了一种前述方法构建的动物模型在研究视网膜内和/或视网膜下纤维化病理机制中的应用。

本发明最后提供了一种重组腺病毒AAV-VEGF在构建视网膜内和/或视网膜下纤维化动物模型中的应用。