[发明专利]BAX全自动病原微生物快速检测系统在非洲猪瘟病毒检测中的应用

说明书

本发明公开了一种BAX全自动病原微生物快速检测系统在非洲猪瘟病毒检测中的应用，包括：首先，向采集的样本中加入样品处理液，并研磨至破碎，离心，取上清液；其次，向上清液中加入DNA抽提液，置于热裂解仪内，热裂解条件为97℃～103℃下恒温处理5min～6min后，再在2℃～8℃下保温5min以上；离心，取上清液；再次，将荧光PCR反应液加入到PCR反应管中，然后，将热裂解后得到的上清液加入到所述PCR反应管中，离心，得到待测样品；最后，将盛有待测样品的PCR反应管置于BAX的反应室内进行上机检测。本发明解决了在不增加实验设备的情况下提升实验室的检测能力，并满足对非洲猪瘟病毒的检测要求的问题。

技术领域

本发明属于非洲猪瘟病毒检测技术领域，具体涉及一种BAX全自动病原微生物快速检测系统在非洲猪瘟病毒检测中的应用。

背景技术

非洲猪瘟(African swine fever，ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swinefevervirus，ASFV)感染家猪和野猪引起的一种烈性传染病，急性型临床上表现为高热、沉郁、厌食、皮肤发绀、各脏器出血，发病率和病死率可高达100％。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告动物疫病，我国将其列为一类动物疫病，是我国重点防范的外来动物疫病之一。ASF在撒哈拉以南的非洲地区、意大利撒丁岛、高加索地区以及俄罗斯和东欧部分国家流行，给疫区国家的养猪业造成巨大的经济损失，并严重冲击畜产品的国际贸易。2018年8月，ASF首次传入我国，随后迅速大范围蔓延，对我国养猪业构成重大威胁，防控形势异常严峻。随着经济全球化发展，ASF呈全球流行态势，持续传入我国的风险极高。鉴于目前无商业化的ASF疫苗，亟需研发可实现快速检测的早期诊断技术，做到对疫情早发现、早控制。

非洲猪瘟病毒属虹彩病毒科虹彩病毒属，该病毒是大型DNA病毒，其基因组为双股线状DNA，大小170～190kb。病毒粒子直径为175～225ms，呈20面体对称，有囊膜。在猪体内，非洲猪瘟病毒可在几种类型的细胞浆中，尤其在网状内皮细胞和单核巨噬细胞中复制。该病毒可在钝缘蜂中增殖。

目前是采用PCR仪来检测非洲猪瘟病毒，那么在检测的过程中就需要单独购买PCR仪器，如何在不增加实验设备的情况下提升实验室的检测能力，并满足对非洲猪瘟病毒的检测要求，是急需解决的一个问题。

发明内容

为了解决在不增加实验设备的情况下提升实验室的检测能力，并满足对非洲猪瘟病毒的检测要求的问题，本发明提供了一种BAX全自动病原微生物快速检测系统在非洲猪瘟病毒检测中的应用。

本发明提供了一种BAX全自动病原微生物快速检测系统在非洲猪瘟病毒检测中的应用。

进一步的，该应用包括如下步骤：

S1、向采集的样本中加入非洲猪瘟快速免提取荧光PCR检测试剂盒内的样品处理液，并研磨至破碎，离心，取上清液；

S2、向S1得到的上清液中加入非洲猪瘟快速免提取荧光PCR检测试剂盒的DNA抽提液，并置于热裂解仪内，且热裂解条件为：97℃～103℃下恒温处理5min～6min后，再在2℃～8℃下保温5min以上；随后，离心，取上清液；

S3、将非洲猪瘟快速免提取荧光PCR检测试剂盒的荧光PCR反应液加入到PCR反应管中，然后，将S2得到的上清液加入到所述PCR反应管中，离心，得到待测样品；

S4、将盛有待测样品的PCR反应管置于BAX的反应室内进行上机检测。

进一步的，在所述S1中，离心速度为9000rpm～11000rpm，离心时间为55s～65s。

进一步的，在所述S2中，所述DNA抽提液与所述S1得到的上清液的体积比为1:0.8～1.2。

进一步的，在所述S2中，热裂解的条件为：100℃下恒温处理5min后，再在2℃～8℃下保温5min以上。