[发明专利]一种樟疫霉的检测靶标Pcinn11345及其检测引物、快速检测方法有效
| 申请号： | 202110339117.2 | 申请日： | 2021-03-30 |
| 公开（公告）号： | CN112852997B | 公开（公告）日： | 2021-09-07 |
| 发明（设计）人： | 戴婷婷;陈贞鹏;刘晓宇;吴翠萍;梁新乾 | 申请（专利权）人： | 南京林业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11;C12N15/31;C07K14/37 |
| 代理公司： | 南京源点知识产权代理有限公司 32545 | 代理人： | 王佳妹 |
| 地址： | 210037 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 樟疫霉 检测 靶标 pcinn11345 及其 引物 快速 方法 | ||
1.一种樟疫霉(P.cinnamomi)的特异性检测靶标Pcinn11345，其特征在于，其DNA序列如SEQ ID NO：1所示。
2.根据权利要求1所述的特异性检测靶标Pcinn11345，其特征在于，所述DNA序列SEQID NO：1编码的蛋白序列如SEQ ID NO：2所示。
3.权利要求1或2所述的特异性检测靶标Pcinn11345在检测樟疫霉(P.cinnamomi)中的应用。
4.权利要求1所述的樟疫霉(P.cinnamomi)的特异性检测靶标Pcinn11345的RPA检测引物及探针组合，其特征在于，所述检测引物中，正向引物序列如SEQ ID NO：3所示，反向引物序列如SEQ ID NO：4所示，所述探针序列如SEQ ID NO：5所示。
5.权利要求4所述的检测引物和探针组合在检测樟疫霉(P.cinnamomi)中的应用。
6.一种检测樟疫霉(P.cinnamomi)的试剂盒，其特征在于，包括1次用量以上的权利要求4所述的检测引物和探针组合。
7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括：装有冻干酶粉的Twist Amp反应单元管、缓冲液Buffer、MgAc、去离子水、HybriDetect assay buffer、侧流层析试纸条。
8.权利要求6-7任一所述的试剂盒在检测樟疫霉(P.cinnamomi)中的应用。
9.一种检测樟疫霉(P.cinnamomi)的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)提取待测样本DNA；
2)以DNA为模板，利用权利要求4所述的引物和探针组合或权利要求6-7任一所述的试剂盒进行RPA扩增；
3)应用侧流层析试纸条进行RPA扩增产物检测；当试纸条出现两条棕色条带，一条位于质控区内，一条位于检测区，则结果为阳性，表明样本中含有樟疫霉(P.cinnamomi)；当试纸条只有质控区出现一条棕色条带，检测区没有条带，则结果是阴性，表明样本中不含有樟疫霉(P.cinnamomi)。
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