[发明专利]一种人参属中药中多糖的分子量与分子量分布的测定方法在审
申请号: | 202110337544.7 | 申请日: | 2021-03-30 |
公开(公告)号: | CN113189213A | 公开(公告)日: | 2021-07-30 |
发明(设计)人: | 杨文志;高秀梅;胡莹;李雪;刘杰 | 申请(专利权)人: | 天津中医药大学 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/74;G01N30/86 |
代理公司: | 北京柏杉松知识产权代理事务所(普通合伙) 11413 | 代理人: | 刘继富;王春伟 |
地址: | 301617 天津市*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 人参 中药 多糖 分子量 分布 测定 方法 | ||
1.一种人参属中药中多糖的分子量与分子量分布的测定方法,所述方法包括:
(1)超声提取人参属中药中的多糖,制备1-10mg/mL的多糖水溶液;
(2)采用高效分子排阻色谱-多角度激光光散射检测器-示差折光检测器联用的方法检测所述多糖水溶液,得到多糖的多角度激光光散射色谱图和示差折光色谱图;
其中,色谱条件包括:
色谱柱:以亲水性球型高聚物为填充剂的色谱柱;
色谱柱分子排阻限:8×105-8×106;
流动相:100-200mmol/L的甲酸铵溶液;
柱温:25-35℃;流速:0.5-0.7mL/min;进样体积:20-50μL;等度洗脱;
多角度激光光散射检测器的检测条件包括:
检测波长:650-670nm;激光角度范围:6-10个,15°-170°;折光指数增量:0.1380mL/g;
示差折光检测器的检测条件包括:
检测器温度:35-45℃;
(3)根据所述多糖的多角度激光光散射色谱图和示差折光色谱图,获得人参属中药中多糖的分子量与分子量分布。
2.根据权利要求1所述的测定方法,其中,所述人参属中药选自人参、西洋参、三七、红参、竹节参、珠子参中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的测定方法,其中,所述色谱条件包括:色谱柱分子排阻限:9×105-2×106。
4.根据权利要求1所述的测定方法,其中,所述色谱柱选自Shodex OHpak SB-805HQ、Shodex OHpak SB-804HQ、TSK G4000 PWXL或UltrahydrogelTM2000。
5.根据权利要求1所述的测定方法,其中,步骤(1)所述超声提取人参属中药中的多糖,包括:取质量为M的人参属中药粉末,溶于体积为V1的水中,超声提取后经纯化、透析、冻干,获得所述多糖;其中,M/V1为(50-200):1mg/mL。
6.根据权利要求5所述的测定方法,其中,超声提取的时间为0.5-1.5h,提取功率为30-50kHz,提取温度为60-80℃。
7.根据权利要求5所述的测定方法,其中,采用Sevage法对超声提取后的多糖进行纯化。
8.根据权利要求5所述的测定方法,其中,采用截留分子量为3000-4000Da的透析袋进行透析,透析的时间为40-60h。
9.根据权利要求1所述的测定方法,其中,步骤(3)所述多糖的多角度激光光散射色谱图和示差折光色谱图,以色谱峰时间为9.0-11.0、11.0-13.5、13.5-16.0、16.0-18.8min进行分段,获得人参属中药中多糖的分子量与分子量分布。
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