[发明专利]一种利用微生物发酵生产L-脯氨酸的方法在审

申请号：	202110333623.0	申请日：	2021-03-29
公开（公告）号：	CN112779205A	公开（公告）日：	2021-05-11
发明（设计）人：	饶志明;龙梦飞;乔郅钠;徐美娟;杨套伟;张显;邵明龙	申请（专利权）人：	江南大学
主分类号：	C12N1/21	分类号：	C12N1/21;C12P13/24;C12R1/19
代理公司：	哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211	代理人：	仇钰莹
地址：	214000 江苏***	国省代码：	江苏;32
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摘要：
搜索关键词：	一种利用微生物发酵生产脯氨酸方法
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【权利要求书】：

1.基因工程菌，其特征在于，沉默表达脯氨酸脱氢酶编码基因、脯氨酸-Na⁺协同转运蛋白编码基因、脯氨酸渗透诱导蛋白编码基因、异柠檬酸裂合酶编码基因中的一个或多个。

2.根据权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述脯氨酸脱氢酶编码基因的基因locus号为B21_01024；所述脯氨酸-Na⁺协同转运蛋白编码基因的locus号为B21_01025；所述脯氨酸渗透诱导蛋白编码基因基因的locus号为B21_03943；所述异柠檬酸裂合酶编码基因的locus号为B21_03847。

3.根据权利要求2所述的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌如(a)～(d)所示任一：

(a)沉默表达脯氨酸脱氢酶编码基因；

(b)沉默表达脯氨酸脱氢酶编码基因和脯氨酸-Na⁺协同转运蛋白编码基因；

(c)沉默表达脯氨酸脱氢酶编码基因、脯氨酸-Na⁺协同转运蛋白编码基因、脯氨酸渗透诱导蛋白编码基因；

(d)沉默表达脯氨酸脱氢酶编码基因、脯氨酸-Na⁺协同转运蛋白编码基因、脯氨酸渗透诱导蛋白编码基因和异柠檬酸裂合酶编码基因。

4.根据权利要求3所述的基因工程菌，其特征在于，以大肠杆菌为出发菌株。

5.一种生产L-脯氨酸的方法，其特征在于，以葡萄糖为碳源，利用权利要求1～4任一所述基因工程菌发酵生产L-脯氨酸。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，将OD₆₀₀为10～20的基因工程菌，以反应体系体积的5％～15％的量加入。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述发酵体中含有酵母抽提物、胰蛋白胨、NaCl、柠檬酸、葡萄糖、微量元素。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，在30～40℃进行反应。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，反应时间不低于40h。

10.权利要求1～4任一所述基因工程菌在制备L-脯氨酸的应用。