[发明专利]一种臧氏牛肝菌菌种分离培养基

说明书

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种臧氏牛肝菌菌种分离培养基，包含大量成分，微量成分，铁盐和生长因子。大量成分包含特定浓度的葡萄糖、麦芽浸粉、无水氯化钙、无水硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸氢二铵、硝酸铵硝酸钾、琼脂；微量成分包含特定浓度的氯化钠、硼酸、一水合硫酸锰、七水合硫酸锌、碘化钾、二水合钼酸钠、五水合硫酸铜、六水合氯化钴；铁盐包含特定浓度的氯化铁、无水硫酸亚铁、乙二胺四乙酸二钠；生长因子包含特定浓度的肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素、甘氨酸。该培养基有利于臧氏牛肝菌菌株生长，菌株活力高，生长速度快，产生的气生菌丝良好，为共生真菌的分子生物学研究和外生菌根真菌的栽培提供了基础保障。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种臧氏牛肝菌菌种分离培养基。

背景技术

褐盖臧氏牛肝菌属于牛肝菌科臧氏牛肝菌属的物种，能与植物形成外生菌根，是一种共生真菌，是研究植物与真菌共生关系的理想材料，分离培养臧氏牛肝菌菌种有利于开展后续分子生物学实验操作，并为外生菌根真菌的栽培提供可能的基础保障。臧氏牛肝菌菌种分离培养的难点在于菌丝易老化，不能获得足够的气生菌丝。

一直以来，共生真菌的分离培养是比较困难的，不同的共生真菌对培养基有不同的要求。通用的共生真菌培养基为MMN培养基，腐生真菌培养基为PDA培养基，但实验发现，使用这两种培养基分离培养臧氏牛肝菌菌种，长势欠佳，菌丝易老化，气生菌丝较少，不适合共生牛肝菌菌种的生长，阻碍了后续研究工作的开展。目前也没有专门针对共生臧氏牛肝菌的培养基配方。

发明内容

为解决上述现有技术的不足，本发明提供一种臧氏牛肝菌菌种分离培养基，使臧氏牛肝菌菌株较长时间保持活力，产生良好的气生菌丝。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种臧氏牛肝菌菌种分离培养基，包含大量成分，微量成分，铁盐和生长因子，其中，所述的大量成分包含浓度为4000-6000mg/L葡萄糖、1000-2000mg/L麦芽浸粉、180-190mg/L无水氯化钙、120-135mg/L无水硫酸镁、320-350mg/L磷酸二氢钾、115-135mg/L磷酸氢二铵、815-835mg/L硝酸铵、940-960mg/L硝酸钾、12000-16000mg/L琼脂；所述微量成分包含浓度为11.5-13.5mg/L氯化钠、3.0-3.2mg/L硼酸、8.2-8.6mg/L一水合硫酸锰、4.1-4.5mg/L七水合硫酸锌、0.400-0.430mg/L碘化钾、0.100-0.140mg/L二水合钼酸钠、0.0115-0.0135mg/L五水合硫酸铜、0.0115-0.0135mg/L六水合氯化钴；所述铁盐包含浓度为4-8mg/L氯化铁、7.0-8.0mg/L无水硫酸亚铁、18.4-18.8mg/L乙二胺四乙酸二钠；所述生长因子包含浓度为40-60mg/L肌醇、0.15-0.35mg/L烟酸、0.15-0.35mg/L盐酸吡哆醇、0.05-0.15mg/L盐酸硫胺素、0.6-1.5mg/L甘氨酸。

作为优选的，所述的大量成分包含浓度为4500-5500mg/L葡萄糖、1200-1800mg/L麦芽浸粉、182-186mg/L无水氯化钙、125-130mg/L无水硫酸镁、330-340mg/L磷酸二氢钾、120-130mg/L磷酸氢二铵、820-830mg/L硝酸铵、945-955mg/L硝酸钾、13000-15000mg/L琼脂；所述微量成分包含浓度为12.0-13.0mg/L氯化钠、3.05-3.15mg/L硼酸、8.4-8.5mg/L一水合硫酸锰、4.2-4.4mg/L七水合硫酸锌、0.410-0.420mg/L碘化钾、0.120-0.130mg/L二水合钼酸钠、0.012-0.013mg/L五水合硫酸铜、0.012-0.013mg/L六水合氯化钴；所述铁盐包含浓度为5-7mg/L氯化铁、7.4-7.8mg/L无水硫酸亚铁、18.6-18.7mg/L乙二胺四乙酸二钠；所述生长因子包含浓度为45-55mg/L肌醇、0.2-0.3mg/L烟酸、0.2-0.3mg/L盐酸吡哆醇、0.08-0.12mg/L盐酸硫胺素、0.8-1.3mg/L甘氨酸。