[发明专利]具有抗菌清除自由基和抑制酪氨酸酶活性的玫烟色苷A及制备方法

说明书

本发明涉及具有抗菌清除自由基和抑制酪氨酸酶活性的玫烟色苷A及制备方法，属于生物制品的提取制备技术领域。玫烟色苷A为浅黄棕色粉末，在200 mg/mL的浓度时，对大肠杆菌的抑菌圈为18.6 mm，对白色链珠菌的抑菌圈为21.3 mm。对二苯基苦基苯肼自由基（DPPH）的半数清除浓度（DC₅₀）为：260μg/mL。对酪氨酸酶的半数抑制浓度（IC₅₀）为：79μg/mL。本发明的玫烟色苷A可通过培养玫烟色虫草菌，然后提取分离得到。本发明的玫烟色苷A可用于制备抗细菌和抗真菌的抗菌剂、自由基清除剂和酪氨酸酶抑制剂，具有制备抗氧化、美白和抗衰老保健品的潜力。本发明的制备方法由于采取微生物发酵生产，环境友好，不受自然环境和资源影响，易实现工业化、自动化、连续化生产。

技术领域

 本发明属于生物制品的提取制备技术领域，具体涉及具有抗氧化、抗菌和酪氨酸酶抑制活性的玫烟色苷A （fumosoroseanoside A）的提取、纯化、结构鉴定和活性测定。

背景技术

玫烟色苷A是从一株玫烟色虫草菌（ Cordyceps fumosorosea）培养物中分离制备得到的新型糖苷类物质，具有抗细菌、抗真菌、清除自由基和酪氨酸酶抑制等活性。

玫烟色虫草的无性型存在于土壤中和寄生在昆虫上，以前被称为玫烟色棒束孢（ Isaria fumosorosea）或玫烟色拟青霉（ Paecilomyces fumosorosea）。该菌寄主广泛，易感染蚜虫、粉虱、甲虫、白蚁、黄蜂以及各种鳞翅目害虫，因此玫烟色虫草菌是一种重要的生物防治真菌。该类真菌由于长期与昆虫协同进化，能产生大量新型生物活性化合物，然而，目前对该类真菌代谢物的研究仍较少，尚未见有关其玫烟色苷类化合物的制备鉴定和生物活性研究报道。

近年来，由于抗生素的滥用，导致抗药细菌越来越多，亟需研发新型抗细菌物质；同时，由于环境污染以及世界人口老龄化等因素，目前免疫低下人群逐年增多，一些条件致病菌，特别是真菌感染病例也呈逐年上升趋势，因此亟需开发开发新型抗细菌和抗真菌活性物质。

最新的研究表明，人类的衰老及许多疾病都与自由基损伤有关。具有清除自由基活性的物质能与自由基反应并使之还原成非自由基化合物，可清除机体代谢过程中产生的过多的自由基，是一种可增进人体健康的重要活性物质。自由基清除剂在非生命体系中有抗氧化作用，能够有效地阻止物质的氧化败坏，对于延长物品的保质期有着重要作用，被广泛用于食品、药品、日用化学品等中，因此有必要研究开发具有清除自由基活性的天然产物。

发明内容

本发明的目的是提供具有抗细清除自由基和抑制酪氨酸酶活性的玫烟色苷A及制备方法。

为寻找新型天然高效的具有抗细菌、真菌活性、清除自由基和和抑制酪氨酸酶活性的物质，发明人首先采用antiSMASH软件对大量虫生真菌的次生代谢基因簇进行了预测，发现玫烟色虫草菌（ C. fumosorosea）有多达40个次生代谢产物合成基因簇，包括28个非核糖体肽基因簇。高效液相色谱-高分辨质谱（HPLC-HRMS）结合DNP(天然产物词典)等多种网络数据库对该菌代谢物初步分析发现玫烟色虫草代谢产物中有多种新化合物。在大量培养和提取的基础上利用硅胶柱色谱和反向色谱分离纯化出玫烟色苷A ，结构式如下：

数据库查询发现，这是一个新化合物。