[发明专利]一种促伤口愈合海参蛋白的制备方法及应用

说明书

本发明公开了一种促伤口愈合海参蛋白的制备方法及应用。其制备方法包括以下步骤：海参清洗后去内脏匀浆；调节PH大于10.0后浸泡1～24h，离心浓缩；过滤后调节至PH3～5，离心取沉淀复溶，冷冻干燥。由本发明方法制备的促伤口愈合海参蛋白可以作为药物或功能保健品应用于严重外伤或手术后伤口恢复，可以采用口服或者敷于外伤伤口表面的方式给药，具有促进伤口加速愈合且减少疤痕生成的作用。本发明的制备方法简单，提取成本低廉，且本发明制备的产品促伤口愈合功能强，能够在一定时间内使伤口愈合率提高20％以上。

技术领域

本申请涉及针对外伤或手术后患者的促伤口愈合药物或功能食品的制备及应用领域，具体涉及海参促伤口愈合蛋白的制备及其在帮助外伤或手术后患者伤口愈合方面的应用。

背景技术

外伤是日常生活中常见的病状，通常可以不经处理即可自愈，但是严重外伤例如拔牙后外伤、手术后外伤以及烧伤，则会转变成慢性伤口，久治不愈会引发伤口处感染，甚至引发死亡。在老年人群体、肥胖人群以及糖尿病人群中，严重外伤的伤口愈合更加困难，会带来其他病症的并发，导致机体产生部分功能障碍。此外，病理性瘢痕修复也是人们即为关注的治疗目标，在伤口产生炎症期间，胶原代谢平衡被打破导致代谢障碍，上皮组织细胞骨架中微丝和微管系统受损，贴覆能力和保护能力下降，皮层软组织严重损伤因而不能完全自行修复，导致疤痕的产生，疤痕增生期的几年时间几乎让患者苦不堪言，而后的萎缩期又使患者面目全非，造成患者极大的身、心双重障碍。如果在伤口恢复期即可以得到良好治疗，则会有利于患者伤口减少疤痕生成，因而找到合适的救治方法，提高伤口愈合效率极为重要。有预测表明疤痕治疗市场2026年将达到产业产值1.12亿美元，年复合增长率为6.41％，尽快研发出适合人群早期伤口修复的药物或功能食品有利于带动此行业的经济发展。

典型的伤口修复的四个阶段包括:(1)血小板介导的止血；(2)炎症；(3)角蛋白细胞增殖和迁移到伤口再上皮化、成纤维细胞迁移、收缩和胶原降解导致瘢痕形成；(4)伤口血管的清除和瘢痕组织的重塑。巨噬细胞作为一种关键的免疫细胞，在机体收到外界创伤起便开始释放大量白细胞介素、肿瘤坏死因子等，这些物质对创伤愈合有着重要调控作用，同时还能够清除机体损伤处细胞碎片、中性粒细胞、入侵生物体和其他凋亡细胞。因此在创伤修复过程中研究巨噬细胞释放的炎症因子随时间变化规律对伤口愈合效率有重要意义。

目前，促伤口愈合的治疗方法包括从药用植物中提取制备的药膏外敷的方式、红外辐照的治疗方式及MicroRNA21技术应用的促伤口愈合。药用植物提取物具有一定毒性，需要把握给药剂量，且需要反复换药揭开伤口，病人不得不忍受痛苦。红外辐照及MicroRNA21的治疗方式成本高昂，操作复杂，设计的治疗器械多，加重经济负担。此外，也有报道采用海参胶原低聚肽和海参多糖治疗伤口愈合的方式。但此两种方法制备成本高，提取技术复杂，提取物制备得率极低，几乎不具备大规模生产可行性，如果开发出产品将严重加剧患者的经济负担。

海参是生活在海边至8000米的海洋棘皮动物，同人参、燕窝、鱼翅齐名，是世界八大珍品之一。《本草纲目拾遗》中记载“海参，味甘咸，补肾，益精髓，摄小便，壮阳疗痿，其性温补，足敌人参，故名海参”。本团队通过小鼠活体实验首次发现从海参体壁中提取到的可溶性蛋白质具有显著的加速伤口愈合能力。本发明的海参蛋白可以通过口服的方式给药或者通过制备成的外用贴剂贴合于伤口表面达到患者外伤修复的效果。通过海参蛋白治疗的小鼠在一定时间内伤口愈合率提高20％以上。分析小鼠血清中白介素IL-10结果表明，经过海参蛋白治疗的小鼠体内血清中的IL-10水平明显提高。IL-10是一种多细胞源、多功能的细胞因子，参与调节细胞的生长与分化以及炎性反应和免疫反应，是目前公认的炎症与免疫抑制因子。IL-10能够抑制巨噬细胞在受到促炎性刺激后诱导发生的代谢程序的改变。因而海参蛋白可以提高受伤小鼠的炎症抑制因子水平，达到促伤口愈合作用的能力。

发明内容

为实现上述目的，本发明提供一种促伤口愈合海参蛋白的制备方法，具体包括以下步骤：

S1、预处理：海参分离内脏，并清洗干净；海参分离后得到的肉质匀浆打碎成浆液状，得到海参浆液；