[发明专利]一种药材布渣叶与海南破布叶的分子鉴定方法有效
| 申请号： | 202110322404.2 | 申请日： | 2021-03-25 |
| 公开（公告）号： | CN113025742B | 公开（公告）日： | 2022-12-06 |
| 发明（设计）人： | 陈士林;孙伟;孟祥霄;熊超;李泽鑫;师玉华;徐文流;翁少全;郑荣波;李词周;张丰源;王艳芳 | 申请（专利权）人： | 广州王老吉大健康产业有限公司;中国中医科学院中药研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州科沃园专利代理有限公司 44416 | 代理人： | 徐翔 |
| 地址： | 511400 广东省广州市南*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 药材 布渣叶 海南 破布 分子 鉴定 方法 | ||
1.一种鉴定药材布渣叶和植物海南破布叶的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、根据提供的药材布渣叶和植物海南破布叶样本，提取样本中的DNA，获得样本中的全基因组DNA；
S2、以步骤S1获得的样本中的全基因组DNA为模板，经HRM-PCR扩增，获得包含完整的ITS2基因间隔区的扩增产物；
S3、对步骤S2所得包含完整的ITS2基因间隔区的扩增产物进行HRM曲线比对分析，即可；步骤S2所述的HRM-PCR扩增时反应体系共配制25μL，包含2×HRM-PCR Master Mix 12.5μL，上、下游引物各1μL，DNA模板1μL，加灭菌双蒸水至25μL；扩增程序为94℃，5min；94℃30s，56℃30s，72℃45s，40个循环；HRM 2s 75-95℃；步骤S2所述HRM-PCR扩增时，采用的上游引物序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物序列如SEQ ID NO.2所示，引物用无菌去离子水溶解并稀释至2.5μmol/μL；步骤S2所述完整的ITS2基因间隔区的序列信息如SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示。
2.一种利用权利要求1所述的方法在区分药材布渣叶与海南破布叶中的应用。
3.一种利用权利要求1所述的方法在鉴定药材布渣叶中是否掺杂有海南破布叶的应用。
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