[发明专利]一种脂滴靶向荧光染料及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种脂滴靶向荧光染料及其制备方法和应用，将1,3‑双(二氰基亚甲基)茚满和4‑[双(4‑甲基苯基)氨基]苯甲醛简单反应并通过重结晶纯化得到纯的2,2'‑(2‑(4‑(二‑对甲苯基氨基)亚苄基)‑1H‑茚‑1,3(2H)‑二亚烷基)二甲基腈。制备方法简单，一步即得，几乎没有副产物，效率高，成本低，具有大规模制备的潜力，制备得到的脂滴靶向荧光染料可用于监测细胞中脂滴的动态变化，可用于区分免疫细胞和肿瘤细胞。

技术领域

本发明涉及纳米医学技术领域，特别涉及一种脂滴靶向荧光染料及其制备方法和应用。

背景技术

传统的荧光材料因为聚集导致猝灭(ACQ)的缺点限制了其在高浓度时的应用，进而影响探针的灵敏度。聚集诱导发光(AIE)分子与传统荧光分子不一样，传统荧光分子在高浓度状态下会荧光强度减弱甚至不发光，而AIE分子则越聚集越发光，这主要是在一定的空间范围内AIE分子自身旋转收到限制，抑制了以非辐射形态散发的激发态能量，打开了辐射衰变的渠道，从而使荧光增强。AIE探针由于背景低从而能够高灵敏度和高分辨下连续监测生物过程。AIE探针主要用于检测生命体中的物质、细胞或者组织成像以及用于诊疗一体化等。

近年来随着人们对聚集诱导发光(AIE)分子的深入研究，科研人员在机理与应用方面做了大量的工作，目前分子内运动受限运动机理被广泛接受。脂滴作为一个动态细胞器在生物体新陈代谢中发挥着极其重要的作用，观察脂滴的发展是研究生物体生理变化极其重要的指标。但是目前大多数报道的AIE荧光染料制备过程复杂，大多数AIE荧光染料为线粒体靶向、内质网靶向、溶酶体靶向等，所以目前亟需有效的脂滴靶向且制备方法简单、纯度高、效率高、成本低的AIE荧光染料。

发明内容

针对现有技术中的缺陷，本发明提出了一种脂滴靶向荧光染料及其制备方法和应用，所述脂滴靶向荧光染料为2,2'-(2-(4-(二-对甲苯基氨基)亚苄基)-1H-茚-1,3(2H)-二亚烷基)二甲基腈，通过将1,3-双(二氰基亚甲基)茚满和4-[双(4-甲基苯基)氨基]苯甲醛简单反应并通过重结晶纯化得到纯的2,2'-(2-(4-(二-对甲苯基氨基)亚苄基)-1H-茚-1,3(2H)-二亚烷基)二甲基腈(MeTIND-4)。

本发明提供一种脂滴靶向荧光染料，所述脂滴靶向荧光染料为2,2'-(2-(4-(二-对甲苯基氨基)亚苄基)-1H-茚-1,3(2H)-二亚烷基)二甲基腈，其结构式如式(Ⅰ)所示：

本发明提供一种脂滴靶向荧光染料的制备方法，包括如下步骤：

(1)将1,3-双(二氰基亚甲基)茚满和4-[双(4-甲基苯基)氨基]苯甲醛溶解于醋酸酐中，得到混合物；

(2)将步骤(2)得到的所述混合物加热反应；

(3)蒸发溶剂，通过重结晶纯化残余物得到纯的2,2'-(2-(4-(二-对甲苯基氨基)亚苄基)-1H-茚-1,3(2H)-二亚烷基)二甲基腈。

进一步的，所述步骤(1)中的所述1,3-双(二氰基亚甲基)茚满和所述4-[双(4-甲基苯基)氨基]苯甲醛的摩尔比为1：1-1：20，所述1,3-双(二氰基亚甲基)茚满和所述醋酸酐的摩尔比为1：1-1：500。

进一步的，所述步骤(2)中所述加热的温度为50～70℃。优选为60℃。

进一步的，所述步骤(2)中所述反应的时间为3～5小时。优选为4小时。

进一步的，所述步骤(3)中所述蒸发溶剂的步骤在真空中进行。

进一步的，所述步骤(3)中所述重结晶使用二氯甲烷和正己烷的混合溶液，所述二氯甲烷和所述正己烷的体积比为1:10。

本发明还提供所述的脂滴靶向荧光染料在观察脂滴动态变化方面的应用。