[发明专利]检测结核分支杆菌的引物对、探针、试剂盒及其应用在审
| 申请号: | 202110313278.4 | 申请日: | 2021-03-24 |
| 公开(公告)号: | CN113151514A | 公开(公告)日: | 2021-07-23 |
| 发明(设计)人: | 黄婉秋;黄健 | 申请(专利权)人: | 黄婉秋;黄健 |
| 主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6848;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司: | 上海序伦律师事务所 31276 | 代理人: | 周东萍 |
| 地址: | 201210 上海市浦东*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 检测 结核 分支 杆菌 引物 探针 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种检测结核分支杆菌的引物对,其特征在于,所述引物对是针对SEQ ID NO:1所示结核分支杆菌IS6110基因序列或其部分序列设计的引物对。
2.根据权利要求1所述的检测结核分支杆菌的引物对,其特征在于,所述引物对是以巢式RPA检测结核分支杆菌的引物对,其包含外引物对和内引物对。
3.根据权利要求2所述的检测结核分支杆菌的引物对,其特征在于,所述外引物对具有如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示的碱基序列,所述内引物对具有如SEQ ID NO:5和SEQID NO:6所示的碱基序列。
4.一种检测结核分支杆菌的探针,其特征在于,所述探针是特异性针对SEQ ID NO:1所示结核分支杆菌IS6110基因序列或其部分序列设计的探针。
5.根据权利要求4所述的检测结核分支杆菌的探针,其特征在于,所述探针具有如SEQID NO:2所示的碱基序列。
6.一种检测结核分支杆菌的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含权利要求1-3中任一项所述的引物对。
7.根据权利要求6所述的检测结核分支杆菌的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包含权利要求4或5所述的探针。
8.一种以巢式RPA检测结核分支杆菌的方法,包括以下步骤:
用针对结核分支杆菌IS6110基因的一对外引物,以待测样本核酸为模板进行第一次RPA反应,扩增目的基因第一片段;
用针对结核分支杆菌IS6110基因的一对内引物,以扩增出的目的基因第一片段为模板、并在加入结核分支杆菌IS6110基因特异性信号探针的条件下进行第二次RPA反应,扩增目的基因第二片段;
通过检测探针信号,获得结核分支杆菌核酸的检测结果。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述信号探针为荧光素标记的探针,所述检测探针信号是利用荧光检测设备检测标记在探针上的荧光素信号。
10.权利要求6或7所述试剂盒在制备检测结核分支杆菌的产品中的应用。
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