[发明专利]一种新冠病毒抗原及其制备方法与应用

说明书

一种新冠病毒抗原及其制备方法与应用，新冠病毒抗原包括一种融合蛋白，该融合蛋白包含Spike蛋白S1结构域部分和HSA部分，其中在所述Spike蛋白S1结构域部分中对应于Spike蛋白的第685位精氨酸被替换为甘氨酸。本发明制备的融合蛋白作为新冠病毒血清抗体检测试剂盒中关键抗原成分，用于新冠抗体的检测；作为疫苗给予动物或人产生抗体，用于新冠病毒的预防。作为治疗性药物给予新冠病人，治疗新型冠状病毒肺炎。

技术领域

本发明属于生物学和医学领域，涉及一种新冠病毒抗原及其制备方法与应用。

背景技术

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)在分类上属于β冠状病毒(Betacoronavirus)，为单链正链RNA病毒。在进化树的位置上与SARS病毒和类SARS(SARS-like)病毒的类群相邻。该疾病以发热、干咳、乏力为主要表现，常伴有气促和呼吸困难等，在严重病例中，新冠肺炎可导致严重急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、多功能衰竭甚至死亡。冠状病毒结构上主要包含棘突蛋白(Spike，S)，胞膜蛋白(Envelope)，核蛋白(Nucleocapsid，N)和囊膜蛋白(Membrance，M)。S蛋白以三聚体的形式在病毒表面形成特殊的花冠结构，在宿主蛋白酶作用下裂解为S1和S2两个亚基，S1亚基包含受体结合区(RBD)，主要功能是与宿主细胞表面受体结合，S2亚基主要功能是介导病毒与细胞的膜融合过程，其关键特征包括融合肽、两个七肽重复区(称为HR1和HR2)和跨膜结构域，S蛋白三聚体和跨膜域相互作用被认为是完成病毒感染膜融合过程的关键。

核酸检测是目前新冠肺炎确诊的“金标准”，但核酸检测有其局限性，例如试剂本身的敏感度问题，核酸检测可能会出现漏检，有一些感染者在感染初期，鼻粘膜采样部位病毒含量低，经过多次核酸检测依然是阴性，导致不能及时发现病毒携带者。病毒侵染人体后，机体免疫系统针对针对病毒产生特异性的抗体，包括IgM和IgG。通过对血清中病毒特异性抗体的检测，及时判断和发现病毒携带者。因此，抗体检测是对核酸检测的重要补充，具有重要的价值。而抗体检测最重要的试剂成分为抗原，抗原的稳定性和抗原的生物学活性决定了检测试剂的灵敏度。

目前市面上常见的新冠病毒抗体检测试剂盒所用抗原，大多是针对Spike蛋白的RBD结构域，而NTD结构域是高度糖基化的部分，与RBD段相比具备更强的免疫原性，更容易激发体内产生抗体，因此RBD结构域作为抗原则无法有效检测针对NTD的抗体，降低检测试剂的灵敏性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新冠病毒抗原及其制备方法与应用。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：一种融合蛋白，其包含Spike蛋白S1结构域部分和HSA部分，其中在所述Spike蛋白S1结构域部分中对应于Spike蛋白的第685位精氨酸被替换为甘氨酸。

优选的技术方案为：所述融合蛋白的结构为S1-HSA或HSA-S1，其中“-”代表化学键或者连接子。

优选的技术方案为：所述Spike蛋白S1结构域部分的氨基酸序列为SEQ ID No：1。

优选的技术方案为：所述融合蛋白的氨基酸序列为SEQ ID No：2。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：一种编码融合蛋白的核苷酸，所述核苷酸的序列为SEQ ID No：3。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：一种重组载体，包含上述的核苷酸。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：一种表达盒，包含上述的核苷酸。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：一种包含上述核苷酸的微生物或宿主细胞。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：一种药物组合物，包含上述的融合蛋白。