[发明专利]一种表面增强拉曼散射快速检测食品中生物胺的方法

权利要求书

1.一种表面增强拉曼散射快速检测食品中生物胺的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）在5mL具塞比色管中加入不同浓度的组胺标准溶液和腐胺标准溶液、1mol/L的NaOH溶液100μL、5 mol/L邻苯二甲醛溶液500μL，混匀后静置5min，形成生物胺衍生物，然后加入100μL金纳米溶液，用pH4的醋酸-醋酸钠缓冲溶液稀释至5mL，涡旋混合1~2min，静置5~10min后，使用便携拉曼仪进行拉曼光谱检测，绘制标准曲线，得到回归方程；根据生物胺及其衍生物的分子结构和拉曼峰位归属，以及生物胺浓度与峰面积的线性关系，确定1632cm^-1处的特征峰作为表面增强拉曼散射检测腐胺的判别依据，1185cm^-1处的特征峰作为表面增强拉曼散射检测组胺的判别依据；

（2）样品处理

奶酪样品：将捣碎的1~5g奶酪样品放入5~10mL 0.1mol/L HCl中，混合均匀，放入微波炉中，500MHz功率下处理3min，完成酸解，冷却后，转移到离心管中，加入Carrez溶液Ⅰ和CarrezⅡ溶液各0.5mL去除蛋白，涡旋混合1min，离心5min，取出上清液，待测；

所述Carrez溶液Ⅰ是将10.6g六铁氰化钾溶解于100mL去离子水中制得；CarrezⅡ是在29.9g乙酸锌、3mL乙酸中添加去离子水至100mL制得；

鱼类及其它样品：

准确称取已经绞碎或匀浆后的水产品、肉类10g，精确至0.01g，置于100mL 具塞锥形瓶中，加入20mL 5%三氯乙酸溶液，振荡提取30min，转移至50mL具塞离心管中，5000r/min离心10min，转移上清液至50mL容量瓶中，残渣用20mL 5%三氯乙酸溶液再提取一次，合并上清液，用5%三氯乙酸稀释至刻度，得提取液；移取提取液10mL于25mL 具塞试管中，加入0.5g氯化钠涡旋振荡至氯化钠完全溶解后加入10mL正己烷，涡旋振荡5min，静置分层后弃去上层有机相，下层试样溶液加入10mL正己烷再除脂一次，得待测液；

（3）样品测定：在5mL具塞比色管中，加入步骤（2）的待测溶液2mL，加入1mol/L NaOH溶液100μL、5mol/L 邻苯二甲醛溶液500μL，混匀后静置5min，形成生物胺衍生物；然后加入100μL金纳米溶液，用pH4的醋酸-醋酸钠缓冲溶液稀释至5mL，涡旋混合1~2min，静置5~10min后，在316 cm^-1及941 cm^-1处进行表面增强拉曼散射检测。

2.根据权利要求1所述的表面增强拉曼散射快速检测食品中生物胺的方法，其特征在于，金纳米溶液的制备如下：将2.2mmol/L柠檬酸溶液150mL加入到带冷凝器的三口烧瓶中，100℃下搅拌15min后，加入25mmol/L氯金酸溶液1mL，回流下搅拌10min，溶液颜色逐渐由黄色变为蓝灰色再变为浅粉色，溶液冷却至90℃，加入60mmol/L柠檬酸溶液1mL及25mmol/L氯金酸溶液1mL，回流下搅拌30min，溶液变酒红色，将溶液立即在冰水浴中冷却至室温，得到金纳米溶液。

3.根据权利要求1所述的表面增强拉曼散射快速检测食品中生物胺的方法，其特征在于：拉曼光谱检测在785nm激发光、激光功率500mW、扫描时间10秒的条件下进行。