[发明专利]一种临床再生抗体自体血液免疫细胞的制备方法及应用

权利要求书

1.一种临床再生抗体自体血液免疫细胞的制备方法，其特征在于，

其制备步骤如下：

1)在无菌室采集患者自体外周血样本：采用含有肝素钠的抗凝管采集外周血；

2)将步骤1)采集的外周血转入离心管中并进行离心分离细胞；

3)将步骤2)离心后的血清转入另外的离心管内；

4)将步骤3)血清转出后的外周血样加入等量的磷酸盐缓冲液稀释；

5)将步骤4)稀释后的外周血样缓慢地悬入另外加有人体淋巴分离液的离心管，并进行离心；

6)将步骤5)离心后的外周血样上方的液体去除，取下部的细胞样；

7)将步骤6)的细胞样加入生理盐水或磷酸盐缓冲液后吹匀后进行离心；

8)将步骤7)离心后的细胞样的上清去除，下部细胞样再加入生理盐水或磷酸盐缓冲液清洗后离心；

9)将步骤8)离心后的细胞样加入培养液后吹匀后，转入175培养瓶内；对细胞进行计数后补充液加入重组人白介素2、人源化抗体CD3单克隆抗体、IFN-r干扰素；

10)将步骤9)细胞样送入培养箱进行培养，每两天观察细胞生长情况，根据细胞生长情况计数补液扩增，即可制得再生抗体自体血液免疫细胞。

2.根据权利要求1所述的一种临床再生抗体自体血液免疫细胞的制备方法，其特征在于，步骤2)离心机的控制参数为：2500r，5min，↑8↓2；步骤5)离心机的控制参数为：2500r，25min，↑8↓2；步骤7)离心机的控制参数为：2000r，5min，↑8↓6；步骤8)离心机的控制参数为：1800r，5min，↑8↓6。

3.根据权利要求1或2所述的一种临床再生抗体自体血液免疫细胞的制备方法，其特征在于，步骤8)和步骤9)中所补充的液体为培养基KBM-581或X-VIVO15、ALy-505N的其中一种。

4.一种权利要求1至3所制备的临床再生抗体自体血液免疫细胞的应用，其特征在于，其应用于制备修复亚健康疾病药物，所用药物包括有效量的再生抗体自体血液免疫细胞，所述药物的受众为制备再生抗体自体血液免疫细胞外周血原料的采集患者。