[发明专利]一种喹诺酮类药物耐药基因gyrA和parE同时发生突变的鼠伤寒沙门菌及其应用

说明书

本发明涉及耐药菌株技术领域，尤其涉及一种喹诺酮类药物耐药基因gyrA和parE同时发生突变的鼠伤寒沙门菌及其应用。本发明的鼠伤寒沙门菌，同时携带二个喹诺酮类药物耐药突变位点，所述二个喹诺酮类药物耐药突变位点分别为：gyrA基因编码产物的第83位的丝氨酸突变为苯丙氨酸；parE基因编码产物的第333位的苏氨酸突变为异亮氨酸。这些突变位点导致沙门菌对喹诺酮类药物表现为耐药或中介耐药。鉴于此，本发明的沙门菌可做为筛选新型抗菌药物的模型材料，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及耐药菌株技术领域，尤其涉及一种喹诺酮类药物耐药基因gyrA和parE同时发生突变的鼠伤寒沙门菌及其应用。

背景技术

沙门菌(Salmonella spp)是公共卫生学上具有重要意义的人畜共患病病原菌，可引起人和动物的伤寒、副伤寒、胃肠炎和败血症等许多严重疾病，使全球遭受巨大的经济损失。目前，全世界已发现约2610种血清型。其中，鼠伤寒沙门菌(Salmonella entericasubsp.enterica serovar Typhimurium)是存在于畜禽及食品中的优势血清型，也是引起人类感染的主要血清型。

喹诺酮类药物，尤其是氟喹诺酮类药物，是治疗多重耐药沙门菌引起的可能危及生命的感染最后可选择的一类重要药物。随着这类药物在临床及生产上的广泛应用，细菌对这类药物的耐药问题日益严重。研究表明沙门菌对喹诺酮类药物的耐药性逐年上升，而鼠伤寒沙门菌耐药率普遍高于其他沙门菌。

沙门菌对喹诺酮类药物产生耐药性最主要的机制是喹诺酮药物作用靶位点DNA螺旋酶(编码基因：gyrA和gyrB)和拓扑异构酶Ⅳ(编码基因：parC和parE)发生基因突变，使酶发生结构改变，从而影响与喹诺酮药物的结合。gyrA、gyrB、parC和parE又称喹诺酮耐药决定区(quinolone resistance-determining regions,QRDR)。另外，质粒介导的喹诺酮类药物耐药机制(plasmid-mediatedquinolone resistance,PMQR)，包括QNR蛋白(编码基因：qnrA、qnrB、qnr C、qnrD、qnrS、qnrVC)、外排泵转运蛋白(编码基因：qepA和oqxAB)，以及乙酰转移酶(编码基因：aac(6’)-Ib-cr)也是导致细菌对喹诺酮类药物敏感性下降的原因。

沙门菌对喹诺酮类药物的耐药程度通常与突变位点位置和数量有关。单一位点突变可引起低水平耐药，若2个或多个突变同时发生，则会导致高水平耐药菌株的产生。目前，已有关于沙门菌QRDR突变菌株的报道中，多以单一位点突变为主，多个突变同时发生而导致高水平耐药菌株的比较少见。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种喹诺酮类药物耐药基因gyrA和parE同时发生突变的鼠伤寒沙门菌及其应用，本发明的沙门菌同时携带二个喹诺酮类药物药物耐药突变位点，可作为筛选功能微生物/新型抗菌药物的模型材料，具有良好的应用前景。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：提供一种鼠伤寒沙门菌，所述鼠伤寒沙门菌同时携带二个喹诺酮类药物耐药突变位点，所述二个喹诺酮类药物耐药突变位点分别为：

gyrA基因编码产物的第83位的丝氨酸突变为苯丙氨酸；

parE基因编码产物的第333位的苏氨酸突变为异亮氨酸。

作为本发明所述鼠伤寒沙门菌的优选实施方式，所述二个喹诺酮类药物耐药突变位点具体为：

gyrA基因的第324位碱基C突变为T；

parE基因的第998位碱基C突变为T。

作为本发明所述鼠伤寒沙门菌的优选实施方式，所述gyrA基因的NCBI登录号为AE006468REGION:2373710..2376422，所述parE基因的NCBI登录号为AE006468REGION:3343969..3345861。