[发明专利]非人动物中的人源化T细胞介导的免疫应答

权利要求书

1.一种经遗传修饰的小鼠细胞，在其基因组中包含：

（a）编码嵌合人/小鼠CD4多肽的第一核苷酸序列，所述嵌合人/小鼠CD4多肽包含人CD4多肽的细胞外部分和小鼠CD4多肽的至少跨膜结构域和胞质结构域，

（b）编码嵌合人/小鼠CD8α多肽的第二核苷酸序列和编码嵌合人/小鼠CD8β多肽的第三核苷酸序列，

其中所述嵌合人/小鼠CD8α多肽包含人CD8α多肽的细胞外部分和小鼠CD8α多肽的至少跨膜结构域和胞质结构域，

其中所述嵌合人/小鼠CD8β多肽包含人CD8β多肽的细胞外部分和小鼠CD8β多肽的至少跨膜结构域和胞质结构域；

（c）分别编码嵌合人/小鼠MHC II α多肽和嵌合人/小鼠MHC II β多肽的第四核苷酸序列和第五核苷酸序列，

其中所述嵌合人/小鼠MHC II α多肽包含人白细胞抗原（HLA） II 类α多肽的细胞外部分和小鼠 MHC II α多肽的至少跨膜结构域和胞质结构域，

其中所述嵌合人/小鼠MHC II β多肽包含HLA II 类β多肽的细胞外部分和小鼠 MHCII β多肽的至少跨膜结构域和胞质结构域；

（d）编码嵌合人/小鼠MHC I多肽的第六核苷酸序列，

其中所述嵌合人/小鼠MHC I多肽包含HLA I 类多肽的细胞外部分和小鼠MHC I多肽的至少跨膜结构域和胞质结构域；以及

（e）未重排的T细胞受体（TCR）α可变区序列，包含至少一个人Vα基因区段和至少一个人Jα基因区段，所述至少一个人Vα基因区段和至少一个人Jα基因区段能够在T细胞中重排以形成可操作地连接至小鼠TCRα恒定区序列的经重排的人Vα/Jα序列；以及

未重排的TCRβ可变区序列，包含至少一个人Vβ基因区段、至少一个人Dβ基因区段和至少一个人Jβ基因区段，所述至少一个人Vβ基因区段、至少一个人Dβ基因区段和至少一个人Jβ基因区段能够在T细胞中重排以形成可操作地连接至小鼠TCRβ恒定区序列的经重排的人Vβ/Dβ/Jβ序列，

其中所述可操作地连接至小鼠TCRα恒定区序列的经重排的人Vα/Jα序列编码人源化TCRα链，所述人源化TCRα链包含可操作地连接至小鼠TCRα恒定结构域的人TCRα可变结构域，

其中所述可操作地连接至小鼠TCRβ恒定区序列的经重排的人Vβ/Dβ/Jβ序列编码人源化TCRβ链，所述人源化TCRβ链包含可操作地连接至小鼠TCRβ恒定结构域的人TCRβ可变结构域。

2.根据权利要求1所述的经遗传修饰的小鼠细胞，其中

（a）所述第一核苷酸序列存在于内源CD4基因座；

（b）所述第二核苷酸序列存在于内源CD8α基因座，并且所述第三核苷酸序列存在于内源CD8β基因座；

（c）所述第四核苷酸序列存在于内源MHC II α基因座，并且所述第五核苷酸序列存在于内源MHC II β基因座；

（d）所述第六核苷酸序列存在于内源MHC I基因座；和/或

（e）所述未重排的TCRα可变区序列存在于内源TCRα可变区基因座，并且所述未重排的TCRβ可变区序列存在于内源TCRβ可变区基因座。

3.根据权利要求2所述的经遗传修饰的小鼠细胞，其中

（a）所述第一核苷酸序列存在于所述内源CD4基因座并且可操作地连接至小鼠CD4启动子和调控元件；

（b）所述第二核苷酸序列存在于所述内源CD8α基因座并且可操作地连接至小鼠CD8α启动子和调控元件，并且所述第三核苷酸序列存在于所述内源CD8β基因座并且可操作地连接至小鼠CD8β启动子和调控元件；

（c）所述第四核苷酸序列存在于所述内源MHC II α基因座并且可操作地连接至小鼠MHC II α启动子和调控元件，并且所述第五核苷酸序列存在于所述内源MHC II β基因座并且可操作地连接至小鼠MHC II β启动子和调控元件；

（d）所述第六核苷酸序列存在于所述内源MHC I基因座并且可操作地连接至小鼠MHC I启动子和调控元件；或

（e）（a）-（d）的任何组合。