[发明专利]一种同时检测多种抗原抗体的方法及其载体制备在审
申请号: | 202110291480.1 | 申请日: | 2021-03-18 |
公开(公告)号: | CN113063940A | 公开(公告)日: | 2021-07-02 |
发明(设计)人: | 王东;任晋楷;王旋;张岩;朱家君;李益民;史巧云;吴晓巍;贾雪荣;戚雨婷;张晓磊;张新娟;乔杉 | 申请(专利权)人: | 北京万泰生物药业股份有限公司 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/58;G01N33/543 |
代理公司: | 北京集智东方知识产权代理有限公司 11578 | 代理人: | 陈亚斌;关兆辉 |
地址: | 102206 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 同时 检测 多种 抗原 抗体 方法 及其 载体 制备 | ||
1.一种抗原抗体载体的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤一 对抗原、抗体进行前处理,得到前处理溶液,对载体进行前处理,得到前处理载体;
步骤二 将前处理溶液稀释后作为包被缓冲液,将前处理载体置于包被缓冲液中进行包被,得到包被载体;
步骤三 将包被载体清洗后进行封闭处理并烘干,得到抗原载体和抗体载体。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,对抗原、抗体进行前处理包括:
将抗原或抗体放入透析袋并置于前处理缓冲液中在2-8℃下保持10-48小时;
其中,所述前处理缓冲液为0.02mmol/L PH7.0-8.0的磷酸盐缓冲液、0.05mmol/LPH7.0-10.0碳酸盐缓冲液或0.05-0.1mmol/L PH7.0-9.0Tris盐缓冲液。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,将前处理溶液稀释后作为包被缓冲液包括:将抗原或抗体的前处理处理溶液采用1x磷酸盐缓冲液和/或1x碳酸盐缓冲液稀释至溶液中抗原或抗体含量为0.1-10ug/ml。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述包被包括:
在温度为35-40℃条件下处理1-4小时,然后再温度为2-8℃下处理8-30小时。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述将包被载体清洗为使用pH6.5-7.5之间的磷酸盐缓冲液清洗3-5次。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述封闭处理包括使用含蛋白的保护液进行封闭,封闭条件为30-40℃温度处理1-4小时。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述含蛋白的保护液为含0.1-1%BSA的PBS缓冲液。
8.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述抗原包括:弓形虫抗原、风疹病毒抗原、巨细胞病毒抗原、单纯疱疹病毒I型抗原、单纯疱疹病毒II型抗原;
所述抗体为抗人IgMμ链抗体。
9.一种抗原载体或抗体载体,其特征在于,采用权利要求1-8任意一项所述的制备方法制得。
10.一种同时检测多种抗原抗体的方法,其特征在于,
将权利要求9所述的抗原载体和抗体载体分别置于对应的反应腔内;
将待测样品处理后加入至样稀储存腔内并混匀,得到待反应样品;
将所述待反应样品分别加入抗原载体和抗体载体所在的反应腔内样品反应;
样品反应完成后,对抗原载体和抗体载体所在的反应腔进行初次清洗;
初次清洗完成后,将酶标试剂注入抗原载体和抗体载体所在的反应腔进行酶标反应;
酶标反应完成后,对抗原载体和抗体载体所在的反应腔进行二次清洗;
二次清洗完成后,将发光底物注入抗原载体和抗体载体所在的反应腔;
发光底物注入完成后,在避光条件下采用CCD获取发光信号,从而得到检测结果;
其中,所述酶标试剂为标记了HRP的抗原和抗体。
11.采用权利要求10所述的方法同时检测优生优育五项IgM和IgG两种抗体10项指标。
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