[发明专利]五味消毒饮的指纹图谱检测方法

说明书

本发明公开了五味消毒饮的指纹图谱检测方法，五味消毒饮建立包括以下步骤：步骤1、五味消毒饮供试品溶液的制备；步骤2、混合对照品溶液的制备；步骤3、线性关系考察；步骤4分别精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；步骤5，将步骤4中获得的五味消毒饮供试品溶液的指纹图谱导出，并导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012A，生成五味消毒饮特征指纹图谱；并通过比对各峰与混合对照品色谱峰保留时间，对五味消毒饮特征指纹图谱进行归属。本发明所提供的五味消毒饮，能全面，客观地表征五味消毒饮的质量。本发明提供的指纹图谱的检测方法具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好等优点。

技术领域

本发明涉及一种中药的检测方法，具体涉及五味消毒饮的指纹图谱检测方法。

背景技术

五味消毒饮出自《医宗金鉴》，由金银花、蒲公英、天葵子、野菊花、五味消毒饮5味药组成，具有清热解毒，消散疔疮等功效，常用于疔毒等症。现代研究表明，本方主要含有绿原酸、咖啡酸、木犀草苷、蒙花苷等成分，具有抗菌、抗炎、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、增强机体免疫功能等作用，临床上广泛用于五官科、内科、外科、妇科等火毒湿热所致的感染性疾患。目前，五味消毒饮临床应用以传统汤剂为主，然而，其质量一致性易受煎煮方式及原药材品质的影响。因此，为了确保五味消毒饮后续研发的剂型能保持原方的药效，有必要建立标准煎液的质量控制方法。

中药复方制剂成分复杂，检测部分指标性成分并不能充分体现整体质量与药效。中药指纹图谱能全面、系统的反映复方制剂的整体特征，已成为中药质量控制的有效手段。本发明采用HPLC法建立五味消毒饮标准煎液的指纹图谱，为五味消毒饮标准煎液的质量评价提供方法及依据。

发明内容

发明目的：本发明的目的是解决现有技术的不足，提供一种五味消毒饮的指纹图谱检测方法，该检测方法可以客观、全面、准确的评价五味消毒饮的质量，对控制五味消毒饮的质量和保证临床疗效具有重要意义。

技术方案：为了实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

一种五味消毒饮的指纹图谱检测方法，包括以下步骤：

步骤1、供试品溶液的制备：

取不同批次的金银花、野菊花、蒲公英、紫花地丁和天葵子，加水浸泡后加热煎煮提取1~3次，过滤，合并药液，减压浓缩，过微孔滤膜，取续滤液，即得；

步骤2、混合对照品溶液的制备：

精密称取绿原酸、咖啡酸、木犀草苷和蒙花苷对照品适量，加甲醇配制成混合对照品溶液；

步骤3、线性关系考察

分别精密称取绿原酸和蒙花苷对照品至容量瓶，加甲醇溶解定容至刻度，然后分别取绿原酸对照品储备液用甲醇稀释至五个梯度浓度，取蒙花苷对照品储备液以甲醇稀释至五个梯度浓度，然后分别注入高效液相色谱仪测定峰面积，以标准品溶液的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，计算回归方程：

步骤4、精密吸取步骤1的供试品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图；

步骤5、将步骤4中获得的不同批次的五味消毒饮供试品溶液的指纹图谱导出，将其导入“中药指纹图谱相似度评价系统2012版，生成五味消毒饮特征指纹图谱；

步骤6、取步骤2制备得到的混合对照品溶液，注入高效液相色谱仪，通过比对各峰与混合对照品色谱峰保留时间，对五味消毒饮特征指纹图谱进行归属；

步骤7、根据步骤3建立的绿原酸和蒙花苷对照品回归方程，计算不同批次供试品溶液中绿原酸和蒙花苷的含量。