[发明专利]一种基于金属离子选择性调控QDs和NMM荧光信号的均相双荧光分析方法及其应用

说明书

本发明提供了一种基于金属离子选择性调控QDs和NMM荧光信号的均相双荧光分析方法及其应用，涉及生物医学诊断分析方法技术领域，该均相双荧光分析方法包括基于金属离子选择性调控QDs和NMM荧光信号，金属离子有效改变QDs的荧光信号和NMM的荧光信号，并基于QDs的荧光信号和NMM的荧光信号定量单一目标物，目标物为β‑Gal或者E.Coli。本发明可用于β‑Gal和E.Coli的高灵敏、简单、均相和低成本双荧光分析中，即定量β‑Gal和E.Coli，为β‑Gal和E.Coli的分析检测提供更多选择。

技术领域

本发明涉及生物医学诊断分析方法技术领域，尤其是涉及一种基于金属离子选择性调控QDs和NMM荧光信号的均相双荧光分析方法及其应用。

背景技术

现有生物化学和医学诊断体系中，主要是依靠单个信号分子的信号强度实现对单一目标物的定量分析。如基于免疫识别反应的酶联免疫吸附分析(ELISA)使用紫外可见分光光度计监测紫外信号、电化学发光分析方法监测三吡啶钌等的电化学信号、荧光分析方法监测荧光染料的荧光信号(如FITC、FAM等)等。

再比如，β-Gal和E.Coli的检测方法上，其β-Gal分析检测方法已有多种报道，然而使用双荧光信号的分析方法极少，对于E.Coli的检测现有临床是利用培养和计数的方法实现细菌的定量，其耗时、灵敏度低、成本高。

目前的β-Gal和E.Coli的检测方法具有以下不足：1.多数为单个信号读取，其准确性易受介质等影响；2.一般无信号放大技术参与的分析方法，分析灵敏度低，信号放大引入时提高了分析灵敏度，同时大大增加成本；3.耗时，操作繁琐，非均相分析方法。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种基于金属离子选择性调控QDs和NMM荧光信号的均相双荧光分析方法，以解决现有技术中依靠单个信号分子实现β-Gal和E.Coli的检测，准确性易受介质等影响，导致分析灵敏度低的技术问题。

本发明的目的之二在于提供一种基于金属离子选择性调控QDs和NMM荧光信号的均相双荧光分析方法的应用。

为了实现上述目的之一，本发明提供了一种基于金属离子选择性调控QDs和NMM荧光信号的均相双荧光分析方法，所述方法包括基于金属离子选择性调控QDs和NMM荧光信号，所述金属离子有效改变QDs的荧光信号和NMM的荧光信号，并基于QDs的荧光信号和NMM的荧光信号定量单一目标物，所述目标物为β-Gal或者E.Coli。

所述NMM为N-甲基卟啉二丙酸。

根据一种优选实施方式，变价或者易于水解的所述金属离子可有效抑制NMM的荧光信号。

根据一种优选实施方式，相同元素的不同价态所述金属离子对NMM的荧光信号抑制作用具有显著差异。

根据一种优选实施方式，所述金属离子为Cu²⁺和Cu⁺，所述QDs和所述NMM选择性识别Cu²⁺和Cu⁺，所述Cu⁺对所述QDs荧光信号和所述NMM荧光信号的抑制作用大于所述Cu²⁺。

根据一种优选实施方式，所述金属离子为Fe³⁺和Fe²⁺，所述QDs和所述NMM选择性识别Fe³⁺和Fe²⁺，所述Fe³⁺对所述QDs荧光信号和所述NMM荧光信号的抑制作用大于所述Fe²⁺。

根据一种优选实施方式，所述NMM和所述QDs的激发波长为399nm，所述NMM和所述QDs的荧光信号监测范围均为400-700nm。

根据一种优选实施方式，所述QDs包括CdTe QDs或者CdSe QDs。