[发明专利]一种芍药甘草汤特征图谱的建立方法

说明书

本发明公开了一种芍药甘草汤特征图谱的建立方法，包括供试样品的制备；包括对照品溶液、供试品溶液、全方溶液以及阴性溶液；芍药甘草汤指标成分含量测定；包括专属性试验、标准曲线绘制；冻干粉含量测定；取X批冻干粉样品，制作供试品溶液，按照色谱条件进样测定，计算芍药苷、甘草苷和甘草酸的含量，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.05％磷酸溶液为流动相B，检测波长为237nm进行梯度洗脱；记录色谱图，统计特征峰的保留时间及相对保留时间；参考指标选择相对保留时间及相对标准偏差，选取参照峰进行归一化值处理，对X批冻干粉样品运用SPSS 22.0软件进行聚类分析，以平方Euclidean距离为指标，组间联接法聚类。

技术领域

本发明涉及一种芍药甘草汤，具体为一种芍药甘草汤特征图谱的建立方法。

背景技术

芍药甘草汤始载于东汉医家张仲景所著《伤寒论》，由芍药、甘草两味药组成，临床应用历史悠久，安全性高，疗效确切。该方配伍精简，具有和营散逆，舒挛止痛的功效。经典名方对药材来源、饮片炮制、配伍比例、制备工艺等进行了严格要求。由于经典名方配方多样，且成分复杂，建立经典名方的质量标准，将经典名方中有效成分量化，更有利保证传统古方的质量及疗效。

为此，提出一种芍药甘草汤特征图谱的建立方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种芍药甘草汤特征图谱的建立方法。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

一种芍药甘草汤特征图谱的建立方法，芍药甘草汤特征图谱的建立方法包括以下步骤：

步骤一：供试样品的制备；

步骤二：芍药甘草汤指标成分含量测定；

步骤三：冻干粉含量测定；

步骤四：芍药甘草汤特征图谱的建立。

优选的，步骤一中的供试样品包括对照品溶液、供试品溶液、全方溶液以及阴性溶液；

具体的，所述对照品溶液包括芍药苷对照品溶液、甘草苷对照品溶液、甘草酸铵对照品溶液，芍药苷对照品溶液的制备方法为：

取芍药苷对照品Mmg，取甲醇3M ml，将芍药苷对照品与甲醇充分混合，即得芍药苷对照品溶液；

甘草苷对照品溶液的制备方法为：

取甘草苷对照品nμg，取70％乙醇20n ml，将甘草苷对照品与70％乙醇充分混合，即得甘草苷对照品溶液；

甘草酸对照品溶液的制备方法为：

取甘草酸铵对照品pμg，取70％乙醇200p ml，将甘草酸铵对照品与70％乙醇充分混合，即得甘草酸对照品溶液；

所述供试品溶液的制备方法包括以下步骤：

步骤S1：取芍药甘草汤冻干粉0.2-0.4g；

步骤S2：将芍药甘草汤冻干粉置于塞锥形瓶中，加入70％甲醇25-30ml，密封锥形瓶，称定重量；

步骤S3：将锥形瓶加热回流1-1.5h，放冷，再次称定重量；

步骤S4：用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，即得供试品溶液。

优选的，所述全方溶液的制备方法包括以下步骤：

步骤P1：取芍药55.00-60.00g，炒甘草55.00-60.00g，置1.8L-2L的砂锅中；

步骤P2：向砂锅加入去离子水600-800ml，盖上盖子，浸泡30-40分钟；