[发明专利]一种抗糖化的胶原蛋白肽及其制备方法有效
申请号: | 202110285551.7 | 申请日: | 2021-03-17 |
公开(公告)号: | CN113024662B | 公开(公告)日: | 2023-04-07 |
发明(设计)人: | 王海燕;刘爱青;闫征 | 申请(专利权)人: | 北京盛美诺生物技术有限公司 |
主分类号: | C07K14/78 | 分类号: | C07K14/78;C12P21/06;C07K1/34;C07K1/18;C07K1/16;C07K1/14;C07K1/36 |
代理公司: | 合肥正则元起专利代理事务所(普通合伙) 34160 | 代理人: | 刘念 |
地址: | 100000 北京市东城区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 糖化 胶原 蛋白 及其 制备 方法 | ||
本发明公开了一种抗糖化的胶原蛋白肽及其制备方法,该抗糖化的胶原蛋白肽由如下步骤制成:步骤S1总蛋白粗提物的制备;步骤S2胶原蛋白粗提物的制备;步骤S3胶原蛋白粗提物的精制;步骤S4胶原蛋白肽的制备;步骤S5抗糖化胶原蛋白肽的制备;本发明制备的抗糖化的胶原蛋白肽富含G l y‑Hyp‑Pro‑G l y‑Arg‑Pro‑G l y‑Hyp序列,分子量范围在850‑1800道尔顿之间,具有安全无毒副作用,易于消化,抗糖化,可以作为药品、保健食品和食品的原料,并且能够添加至酸性饮料中,能够用于改善皮肤水分皱并改善血管弹性。
技术领域
本发明涉及多肽合成技术领域,具体涉及一种抗糖化的胶原蛋白肽及其制备方法。
背景技术
20世纪,人类平均寿命增加了30年,老化引起了研究者的巨大兴趣。老化是一种复杂的过程,有多种机制参与,包括基因组突变的累积,有毒代谢产物的堆积、激素减少及糖化导致的大分子交联等。糖化反应是一种发生于游离氨基和还原糖之间的非酶促反应,即蛋白质的糖基化反应。这一反应能够产生糖化终末产物(advancedglycationendproducts,AGE),如羧甲基赖氨酸,羧乙基赖氨酸,糖基化胶原等。由于皮肤组织真皮细胞外机质中的胶原蛋白可逆转性低,更容易与葡萄糖等代谢分子发生非酶促反应生成AGEs,对组织产生一系列不良影响,因此推测糖化在老化中发挥重要作用。
胶原蛋白肽是将大分子胶原蛋白经酶解后制成的小分子肽类产品。据研究报道,胶原蛋白肽有提高皮肤水分、减少皱纹,抗衰老等作用,但是没有关于抗糖化胶原蛋白肽的报道。
本专利试图制备一种对皮肤抗糖化起作用的胶原蛋白肽,使之能延缓组织老化,尤其对有助于糖尿病人皮肤护理和治疗。
发明内容
本发明的目的在于提供一种抗糖化的胶原蛋白肽及其制备方法。
本发明要解决的技术问题:
现有的胶原蛋白肽抗糖化效果差,不利于延缓皮肤衰老、改善血管弹性、以及糖尿病人皮肤护理和治疗。
本发明的目的可以通过以下技术方案实现:
一种抗糖化的胶原蛋白肽,由如下步骤制成:
步骤S1总蛋白粗提物的制备:称取原料加入氢氧化钠溶液浸泡2-4h,清洗2-3次,加入软化水,在研磨机中匀浆至糊状,制得总蛋白粗提物;
步骤S2胶原蛋白粗提物的制备:将总蛋白粗提物调整pH值为2-4,加热至75-90℃,保温提胶3-8h,制得胶原蛋白粗提物;
步骤S3胶原蛋白粗提物的精制:将澄清剂加入胶原蛋白粗提物中,调整pH值为2-7,搅拌均匀后静置2-8h,制得胶原蛋白精制物;
步骤S4胶原蛋白肽的制备:将胶原蛋白精制物调节pH值为5-8,加入复合蛋白酶酶解,在温度为45-60℃的条件下,酶解2-6h,得到酶解液;
步骤S5抗糖化胶原蛋白肽的制备:将酶解液采用2KD超滤膜过滤,再通过纳滤去除无机盐和水溶性游离氨基酸,喷雾干燥后得到胶原蛋白肽;将胶原蛋白肽经离子交换树脂、凝胶柱层析纯化后,通过荧光检测糖化抑制率,得到抗糖化胶原蛋白肽。
进一步,步骤S1所述的原料为动物的皮、鳞或骨中的一种,氢氧化钠溶液的质量分数为0.5%。
进一步,步骤S3所述的澄清剂为秋葵胶,仙草胶,瓜尔豆胶以质量比1:1-3:2-6混合并静置4-6h,澄清剂的加入量为胶原蛋白粗提物质量的0.1-2%,澄清剂的pH值为2-4。
进一步,步骤S4所述的复合蛋白酶为碱性蛋白酶和风味酶组合,两种酶质量比为5:2,组合酶的加入量为胶原蛋白精制物质量的0.4%-1%,酶解pH值为7.5-8.0。
所述酶解温度为50-60℃,酶解时间为4-6h。
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