[发明专利]一种超灵敏SERS免疫传感器的制备方法及其在宫颈癌血清生物标志物检测的应用在审

申请号：	202110285129.1	申请日：	2021-03-17
公开（公告）号：	CN113049823A	公开（公告）日：	2021-06-29
发明（设计）人：	卢丹;曹小卫;冉梦林;刘依帆;史宏灿	申请（专利权）人：	扬州大学
主分类号：	G01N33/574	分类号：	G01N33/574;G01N21/65
代理公司：	扬州苏中专利事务所(普通合伙) 32222	代理人：	沈志海
地址：	225009 ***	国省代码：	江苏;32
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摘要：
搜索关键词：	一种灵敏 sers 免疫传感器制备方法及其宫颈癌血清生物标志检测应用
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【权利要求书】：

1.一种超灵敏SERS免疫传感器的制备方法，其特征是，在制备Au@SiO₂阵列基底的过程中，使用Langmuir-Blodgett方法获得单层SiO₂微球阵列，然后用油水界面自组装法在SiO₂微球表面覆盖单层AuNPs；通过有限差分时域模拟基底的增强电磁场；SiO₂微球表面上的电磁场以及相邻微球之间的间隙均得到增强，证明Au@SiO₂阵列基底具有高密度“热点”；

4-氨基苯硫酚(4-ATP)和5,5'-二硫代双-(2-硝基苯甲酸)(DTNB)的拉曼峰很容易区分，选择它们来制备两个探针，它们不仅可以通过-SH键抓住Au-AgNS，而且还可以通过形成酰胺键与抗体结合；将抗survivin抗体和抗OPN抗体与Au@SiO₂阵列基底和Au-AgNSs连接后，制成了由免疫基底和免疫探针组成的SERS免疫传感器。

2.根据权利要求1所述的一种超灵敏SERS免疫传感器的制备方法，其特征是，包括：

1)血液样本的采集和处理；

2)免疫基底的制备；

2.1)AuNPs的合成；

2.2)SiO₂微球的合成；

2.3)亲水硅片的制备；

2.4)单层SiO₂微球阵列的制备；

2.5)Au@SiO₂阵列基底的制备；

2.6)抗survivin抗体和抗OPN抗体偶联的Au@SiO₂阵列基底的制备；

3)Au-AgNS的合成；

4)Au-AgNSs免疫探针的制备。

3.根据权利要求2所述的一种超灵敏SERS免疫传感器的制备方法，其特征是，步骤1)血液样本的采集和处理：血清样本分为健康人群、CIN 1、CIN 2、CIN 3和宫颈癌患者五组，在早餐前抽取5mL静脉血，在4℃下3000r/min转速离心处理10min之后，将获得的血清样本保存在-80℃下。