[发明专利]一种生物发酵生产长链二元酸的方法

权利要求书

1.一种生物发酵生产长链二元酸的方法，其采用热带假丝酵母或维斯假丝酵母作为发酵微生物，包括下述步骤：

1)采用两级种子罐对微生物进行培养，其中一级种子罐培养后菌体生长密度(OD620)大于0.5；

2)二级种子罐培养结束后将菌液接入到发酵罐中进行发酵，发酵期间pH控制在6.8-7.1范围内。

2.根据权利要求1所述的生物发酵生产长链二元酸的方法，其中所述一级种子罐经历如下过程：碱水煮罐：pH≈12，120℃，4h；空消：130℃，1h；实消：消前适当调节pH，使种前pH在6.7～7.0范围内；温度121-123℃，保温30分钟，实消后体积1.4-1.6m³；实消结束，迅速降温，待温度降至30℃±0.5℃时接种、培养。

3.根据权利要求1所述的生物发酵生产长链二元酸的方法，其中一级培养工序如下控制：(1)前期正常培养，当溶氧接近40％时，提高风量，确保溶氧保持在40％-50％，风量逐步提高；(2)当菌体生长密度(OD620)大于0.5，菌液溶氧、pH反弹，一级培养结束。

4.根据权利要求1所述的生物发酵生产长链二元酸的方法，其中所述二级种子罐经历如下过程：碱水煮罐：pH≈12，120℃，4h；空消：130℃，1h；实消前定容17.5t，实消：消前适当调节pH，使种前pH在6.7～7.0范围内；温度121-123℃，保温30分钟；实消结束，迅速降温，待温度降至30℃±0.5℃时接种、培养；其中，碳源为葡萄糖时则单消定容1.5t，二级种子罐定容16t，温度113-115℃，保温30分钟，接种前压入二级种子罐。

5.根据权利要求1所述的生物发酵生产长链二元酸的方法，其中二级培养工序如下控制：(1)前期正常培养，当溶氧接近40％时，提高风量，确保溶氧保持在40％-50％，风量逐步提高；(2)菌液溶氧、pH反弹，二级培养结束。

6.根据权利要求1所述的生物发酵生产长链二元酸的方法，其中底料水和碳源连消，氮源实消，消后压入发酵罐。

7.根据权利要求1所述的生物发酵生产长链二元酸的方法，其中发酵过程中采用流加方式补加二次碳源，补加烷烃原料前结束；补加二次碳源结束后，调节pH至6.9，补加烷烃原料：前三次间隔6h，每次补加烷烃原料3.5t，之后根据残烃，低于4％补加烷烃原料3t，补加至发酵过程控制溶氧在40％-50％。

8.根据权利要求7所述的生物发酵生产长链二元酸的方法，其中所述二次碳源为葡萄糖或蔗糖。

9.根据权利要求1所述的生物发酵生产长链二元酸的方法，其中发酵后期根据菌体活力考虑烷烃添加量，发酵结束时控制pH降至6.5。

10.由前述权利要求1-9任意一项所述的方法生产的长链二元酸。