[发明专利]一种杜仲叶和杜仲雄花提取物及其产品中多指标成分检测方法

说明书

本发明公开了一种杜仲叶和杜仲雄花提取物及其产品中多指标成分检测方法的建立方法，该方法包括：步骤1供试品溶液的制备；步骤2对照品溶液的制备；步骤3色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，0.1％磷酸为流动相B，进行梯度洗脱；检测波长：206nm；柱温：20～30℃；流速：1.0ml^.min^‑1；步骤4测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明还对该方法的建立方法进行了方法学验证。本发明采用一种对照品同时检测5中指标性成分，本发明具有经济、快捷、稳定、精密度好、准确度高及适用范围广等优点，有利于全方位的控制杜仲叶、杜仲雄花及其产品的质量，具有广泛的应用性。

技术领域

本发明涉及中药提取物及其制剂质量控制方法，具体涉及一种杜仲叶和杜仲雄花提取物及其产品中多指标成分检测方法。

背景技术

杜仲(Eucommia ulmoides Oliv)是中国特有的名贵经济树种,也是世界上适应范围最广的重要胶原植物,在我国亚热带至暖温带的26个省(区、市)均有栽培。杜仲的药用及食用价值部位包括杜仲皮、杜仲叶和杜仲雄花。主要有效成分为桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、绿原酸、芦丁、异槲皮苷等化合物，具有补肝肾、强筋骨、健腰膝、安胎气、降血压等功效,为中药上品。而杜仲叶和杜仲雄花提取物广泛的应用于医药和食品领域

由于中药的特殊性和复杂性，单个指标性成分已无法满足质量控制的目的，采用多指标成分同时控制已成必然。但中药的多指标成分同时检测以对产品进行质量控制对对照品的需求以及工作量要求更高，成本相应加大。一标多测即可以降低对照品的需求，同时也简化了检测方法，很好的满足了当前和后期对中药及药食两用产品的质量控制要求。

建立以绿原酸为内参物，同时检测桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、绿原酸、芦丁、异槲皮苷含量的一标多测法，并应用于杜仲叶和杜仲雄花原药材、提取物、中间体及其制剂产品具有重要意义。

目前，以绿原酸为内参物，同时检测桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、绿原酸、芦丁、异槲皮苷含量的一标多测法，尚未见文献报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种杜仲叶和杜仲雄花原药材、提取物、中间体及其制剂产品的质量控制方法。为此，本发明提供一种杜仲叶和杜仲雄花提取物及其产品中多指标成分检测方法。

本发明提供了一种杜仲叶和杜仲雄花提取物及其产品中多指标成分检测方法，包括以下步骤：

步骤1、供试品溶液的制备：精密称取样品粉末约0.2～3.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入20～100％甲醇50ml，称定重量，超声处理10～60分钟，放冷，再称定重量，用20～100％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

步骤2、对照品溶液的制备：取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色容量瓶中，加甲醇制成每1ml含有绿原酸10～100μg的溶液，即得。

步骤3、色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，0.1％磷酸为流动相B，进行梯度洗脱；检测波长：206nm；柱温：20～30℃；流速：1.0ml·min^-1。

前述方法的梯度洗脱程序为：

洗脱时间 流动相A(％) 流动相B(％)

0～28min 5→12 95→88

28～50min 12→20 88→80

50～51min 20→50 80→50