[发明专利]一种鱼精蛋白短肽修饰的紫杉醇脂质体及其制备方法

说明书

本发明提供了一种鱼精蛋白短肽修饰的紫杉醇脂质体及其制备方法，属于药物制剂技术领域。本发明提供的鱼精蛋白短肽修饰的紫杉醇脂质体，包括如下原料：鱼精蛋白短肽LMWP，紫杉醇，卵磷脂，胆固醇，葡萄糖。本发明使用鱼精蛋白短肽LMWP结合脂质体包埋技术操作简便、获得的紫杉醇脂质体性质稳定、生物利用率高，平均粒度为124.43 nm左右，比一般紫衫醇脂质体粒径更小，且zeta电位为‑40.6mV，贮藏稳定性良好。而且本发明鱼精蛋白短肽修饰的紫杉醇脂质体水溶性增加，在细胞中含量也随之增加，有增强药效的作用，并且鱼精蛋白可明显降低肿瘤内血管密度，具有抗肿瘤作用。

技术领域

本发明属于药物制剂技术领域，尤其涉及一种鱼精蛋白短肽修饰的紫杉醇脂质体及其制备方法。

背景技术

紫杉醇类化合物属二萜类生物碱，是已知疗效好的植物源抗肿瘤药物之一。它对多种恶性肿瘤具有明显抗癌活性，包括卵巢癌、非小细胞肺癌、胃癌及头颈部肿瘤等恶性肿瘤有非常理想的疗效。紫杉醇水溶性差，在水中溶解度＜0.03g/L，因此需要在紫杉醇注射剂中加入聚氧乙烯蓖麻油及适量的无水乙醇作为增溶剂，而使用聚氧乙烯蓖麻油作为增溶剂，有40%概率会引起严重过敏反应，使其在临床得不到有效推广。因此，改善紫杉醇的水溶性在紫杉醇开发和应用上，具有重大意义。

脂质体是由一种或多种两亲性分子双层膜包裹而成的具有一个或多个水性腔室的微泡，将药物包裹或镶嵌在脂质体中形成脂质体药物，具有无毒无害、无免疫原性、选择性高、可缓释延长药物作用时间、易于体内降解的特点，还能降低药物不良反应，提高药物的治疗指数，改善药物药代动力学的性质和体内分布。总而言之，脂质体在抗肿瘤方面的应用前景很好。

来源于鱼精蛋白的短肽LMWP是由 14 个氨基酸组成的细胞穿膜肽（氨基酸序列：VSRRRRRRGGRRRR），由于精氨酸结构中的胍基和细胞膜上具有负电荷的黏多糖结合形成了比较牢固的二齿状氢键，其产生的离子对在膜电位作用下易位穿过细胞膜，常用来修饰药物，提高药物进入肿瘤细胞的能力。

近年来，文献报道了很多制备紫杉醇脂质体的方法，最新的公开号为CN111329838 A的专利文件使用蛋黄卵磷脂（最佳比例的磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺）获得稳定性更好的紫杉醇脂质体，尽管如此，由于细胞膜的天然屏障作用，许多生物大分子很难进入细胞发挥疗效，脂质体仍存在可被肝脏和脾脏的单核吞噬系统迅速清除，代谢过快而影响药效和靶向性差等问题。也有文献报道用鱼精蛋白肽结合紫杉醇生成聚合物的研究，但是操作复杂，应用性不强。现有技术中还并未有鱼精蛋白肽结合脂质体方法对紫杉醇进行修饰的有关研究。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种鱼精蛋白短肽修饰的紫杉醇脂质体，具有性质稳定、生物利用率高、制备方法简便的优势。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种鱼精蛋白短肽修饰的紫杉醇脂质体，在制备紫杉醇脂质体时加入鱼精蛋白短肽。

优选的，所述紫杉醇脂质体的制备原料包括：鱼精蛋白短肽LMWP，紫杉醇，卵磷脂，胆固醇和葡萄糖。

优选的，所述鱼精蛋白短肽LMWP、紫杉醇、卵磷脂、胆固醇、葡萄糖的重量比为0.5~2：2~5：15~60：5~10：0.5~10。

本发明还提供了一种上述紫杉醇脂质体的制备方法，包括如下步骤：将紫杉醇、卵磷脂、胆固醇溶于溶剂中，除菌后除去溶剂形成薄膜；用含有鱼精蛋白短肽LMWP的葡萄糖溶液洗膜，均质处理，得到脂质体悬浮液，冷冻干燥得到紫杉醇脂质体冻干粉。

优选的，所述溶剂为无水乙醇。

优选的，所述卵磷脂与无水乙醇的质量体积比为1g：25~50mL。

优选的，所述葡萄糖溶液中鱼精蛋白短肽LMWP的质量份数为2~5%。