[发明专利]一种生殖道分泌物多重荧光染色液及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种生殖道分泌物多重荧光染色液，其特征在于，所述的生殖道分泌物多重荧光染色液包括荧光素、核酸染料、抑菌剂、防淬灭剂、通透剂和缓冲液；pH4.5-6.0。

2.根据权利要求1所述的生殖道分泌物多重荧光染色液，其特征在于，所述的荧光素为吖啶橙、异硫氰酸荧光素、四乙基罗丹明、四甲基异硫氰酸罗丹明、5-羧基-4,7-二氯罗丹明6G、6-羧基-4,7-二氯罗丹明6G、5-羧基-4,7-二氯四甲基罗丹明、6-羧基-4,7-二氯四甲基罗丹明、5-羧基-4,7-二氯-X-罗丹明、AMCA琥珀酰亚胺酯、AMCA C2马来酰亚胺、7-二乙胺基-2-氧代-2-苯并吡喃-3-羧酸、AMCA乙二胺、EDANS酸5-(2-氨基乙氨基)-1-萘磺酸、EDANS钠盐5-(2-氨基乙氨基)-1-萘磺酸钠盐、EDANS C2马来酰亚胺、生物素酰肼或生物胞素酰肼中的一种或几种的组合。

3.根据权利要求1所述的生殖道分泌物多重荧光染色液，其特征在于，所述的核酸染料为6-羧基荧光素、5(6)-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯、氨基烯丙基-DUTP钠盐、DAPI、碘化丙啶、溴化乙啶或溴化乙啶衍生物中的一种或几种的组合。

4.根据权利要求1所述的生殖道分泌物多重荧光染色液，其特征在于，所述的抑菌剂为Proclin 300、叠氮钠、硫柳汞、山梨酸钾、异噻唑啉酮、庆大霉素、甲醛或多聚甲醛中的一种或几种的组合。

5.根据权利要求1所述的生殖道分泌物多重荧光染色液，其特征在于，所述的防淬灭剂为甘油、P-苯二胺、n-丙基没食子酸盐、1，4-二偶氮双环-辛烷、4-二甲胺偶氮苯-4’-羧酸、4-[4-(二甲基氨基)苯偶氮]苯甲酸N-丁二酰亚胺酯、DABCYL C2胺、DABCYL C2马来酰亚胺或抗坏血酸中的一种或几种的组合。

6.根据权利要求1所述的生殖道分泌物多重荧光染色液，其特征在于，所述的通透剂为Triton X-100或吐温。

7.根据权利要求1所述的生殖道分泌物多重荧光染色液，其特征在于，所述的缓冲液为乙酸-乙酸钾缓冲液、硼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、Tris-Hcl缓冲液中的一种或几种的组合。

8.根据权利要求7所述的生殖道分泌物多重荧光染色液，其特征在于，所述的生殖道分泌物多重荧光染色液包括吖啶橙0.01-100mg/L，碘化丙啶0.01-100mg/L，多聚甲醛0.01-5g/L，甘油10-100mL/L，P-苯二胺0.1-1g/L，Triton X-100 1-10mL/L，乙酸钾1-30g/L，乙酸1-10mL/L，纯化水补足至1L；pH4.5-6.0。

9.权利要求8所述的生殖道分泌物多重荧光染色液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.将乙酸钾溶于纯化水中，搅拌至完全溶解；

S2.添加乙酸，调节pH值为4.5-6.0；

S3.将荧光素、核酸染料溶解于S2所得的溶液中，搅拌均匀至完全溶解；

S4.依次将抑菌剂、防淬灭剂及通透剂添加至S3所得溶液中，搅拌均匀；

S5.调节S4所得溶液pH值为4.5-6.0，即得生殖道分泌物多重荧光染色液。

10.权利要求1-8任一项所述的生殖道分泌物多重荧光染色液在检测阴道分泌物样本、宫颈脱落细胞样本中的应用。