[发明专利]针对新型冠状病毒核衣壳蛋白的抗体或其抗原结合片段及其应用

说明书

本发明提供了一种针对新型冠状病毒核衣壳蛋白的抗体或其抗原结合片段及其应用，所述抗体选自mAb6抗体、mAb7抗体、mAb8抗体和mAb9抗体中的任意一种；且所述抗体由保藏号为CCTCC NO：C2020236、CCTCC NO：C2020237、CCTCC NO：C2020238或CCTCC NO：C2020239的杂交瘤细胞分泌。利用所述抗体能够检测环境样品和/或生物样品中新型冠状病毒或者其抗原的存在情况。此外，本发明还提供了利用所述抗体制备得到的新型冠状病毒检测试剂盒，能够在感染病毒早期就检测出核衣壳蛋白，为临床检测新型冠状病毒提供了快速、准确的手段。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及针对新型冠状病毒的抗体，尤其涉及一种针对新型冠状病毒核衣壳蛋白的抗体或其抗原结合片段及其应用。

背景技术

新型冠状病毒（SARS-CoV-2）属于β冠状病毒属，已知可引起中东呼吸综合征的MERS病毒和严重急性呼吸综合征的SARS病毒均属于该种属。新型冠状病毒引起的急性呼吸道传染病为新型冠状病毒肺炎（COVID-19），其临床表现以发热、乏力、干咳为主，鼻塞、流涕等上呼吸道症状少见，且会出现缺氧低氧状态。

目前，已经有的临床新型冠状病毒检测试剂有针对血清抗体检测的酶联免疫方法和针对病毒遗传物质检测的RT-PCR方法。由于感染后抗体产生需要1-3周的窗口期，基于目前的流行病学调查，新型冠状病毒潜伏期一般为3-7天，最长不超过14天，所以抗体检测对早期诊断没有意义。加之目前的抗体检测具有较高的假阳性率，特异性无法满足需要。

核酸检测有较高的特异性和灵敏度，但是该检测方法对技术要求高，容易出现假阴性，标本需要特殊处理，要求具备PCR扩增仪及凝胶电泳等专业的仪器设备，对新型冠状病毒的检测用时长，需专业技术人员操作和判断检测结果，无法应用于社区、基层医院、机场、海关甚至家庭等基层的早期初步筛查。因此，针对新型冠状病毒的抗原诊断方法，尤其是快速、敏感、特异的抗原诊断方法在COVID-19诊断中具有无可取代的意义。

在病毒体组装过程中，核衣壳蛋白（N蛋白）与病毒RNA结合并导致螺旋核衣壳的形成。核衣壳蛋白是一种高度免疫原性的磷蛋白，与病毒基因组复制和调节细胞信号通路有关。核衣壳蛋白也是冠状病毒中含量最丰富的蛋白。由于核衣壳蛋白的序列保守性和强大的免疫原性，核衣壳蛋白常被作为冠状病毒的诊断检测工具。

因此，迫切需要开发一种可在感染早期测定样品是否存在新型冠状病毒抗原的产品，从而满足临床需要。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种针对新型冠状病毒核衣壳蛋白的抗体或其抗原结合片段及其应用。使用新型冠状病毒核衣壳蛋白为抗原免疫小鼠，得到免疫血清效价最高的小鼠，获取杂交瘤细胞并保藏；所得杂交瘤细胞分泌的抗体或其抗原结合片段能够特异性地结合核衣壳蛋白，进而能够将其制成试剂盒用于检测新型冠状病毒。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供一种针对新型冠状病毒核衣壳蛋白的抗体或其抗原结合片段，所述抗体选自mAb6抗体、mAb7抗体、mAb8抗体和mAb9抗体中的任意一种；

其中，所述mAb6抗体由保藏号为CCTCC NO：C2020236的杂交瘤细胞株#mAb6分泌，所述mAb7抗体由保藏号为CCTCC NO：C2020237的杂交瘤细胞株#mAb7分泌，所述mAb8抗体由保藏号为CCTCC NO：C2020238的杂交瘤细胞株#mAb8分泌，所述mAb9抗体由保藏号为CCTCCNO：C2020239的杂交瘤细胞株#mAb9分泌。

本发明发现，所述针对SARS-CoV-2病毒N蛋白的特异性抗体可以用于测定样品中SARS-CoV-2病毒或其相应抗原的存在情况或者含量，并可达到很高的灵敏度和稳定性。