[发明专利]一种大黄三味制剂检测方法

说明书

本发明涉及一种大黄三味制剂的检测方法，该方法包括诃子薄层色谱鉴别，大黄有效成分的HPLC含量测定方法，以及指纹图谱法。能更全面、准确检测大黄三味制剂的药效成分，更加符合蒙中药药效作用物质基础的多成分多靶点特点，利于大黄三味制剂的质量提高和标准控制。

技术领域

本发明属于蒙中药制药技术，尤其涉及一种大黄三味制剂的检测方法。

背景技术

大黄三味片现执行局部颁标准WS-10173(ZD-0173)-2002，是申请人的独家品种，它由大黄、诃子、碳酸氢钠等以上三味，将大黄与诃子粉碎成粗粉，加水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.30～1.35(50℃)的稠膏，减压干燥，粉碎成细粉，加入碳酸氢钠，混匀，制成颗粒，压制1000片，包糖衣或薄膜衣，即得。其具有蒙医：缓泻，清热。用于大便干燥，胃胀，腹痛，闭经。中医：清热通便。用于热结便秘，胃胀胃痛，呕逆吞酸。

目前局部颁标准的检测方法主要包括大黄药材的鉴别，以及大黄酚和大黄素的高效液相含量测定。然而该质量检测方法仅针对其中一种中药大黄，以及大黄中仅两个单体成分。刘圆等报道大黄三味胶囊的质量标准研究，提供了诃子的定性鉴别，采用没食子酸为对照，并采用A氯仿-醋酸乙酯-甲酸(6∶4∶1)、B醋酸乙酯-甲酸-甲醇(9∶1∶0.2)两种展开剂，同时对大黄酸、大黄酚进行含量测定。然而目前的方法对大黄三味制剂的质量把控仍显不足，不能满足当前蒙中药制药水平提高的需要。

王伽伯在大黄药材两种化学型蒽醌比例特点及其对金葡菌生长代谢热动力学变化的影响的报道中，表明不同品种、规格的大黄药材其所含的蒽醌单体成分的含量比例差别较大；且研究证明其不同蒽醌单体成分之间生物活性存在明显差异。因此，大黄药材质量的整体疗效优劣不仅与总蒽醌的含量有关，可能还受到蒽醌单体成分含量比例的影响。该研究还进一步报道大黄药材可根据其酸水解后大黄酸或大黄酚含量的多少，将其区分为大黄酸型和酚型 2种化学类型,其中大黄酸型药材大多产于青海、西藏、川西、甘肃等传统道地产区,且报道大黄酸在多种药理作用方面以及药代动力学性质都优于大黄酚,初步认为大黄酸型药材可能是优质大黄药材。研究结果表明由于大黄药材中所含的蒽醌单体成分对其抑菌活性都有影响,特别当大黄酸和大黄酚两种成分的比例非常接近的时候,两种化学型大黄药材的抑菌活性差别较小。结果还表明大黄酸型药材的抑菌活性与总大黄酸或游离大黄酸的含量无关，推断大黄药材对金葡菌抑制作用的强弱除与化学型相关外,可能还受到其他未知特征成分的影响。因此，现有技术仍未发现检测控制大黄三味制剂中主要蒽醌成分含量比例对药效质量影响这一技术问题，也未提供有力的解决方案。

另外，大黄三味制剂中主要含有大黄、诃子两种成分，詹轶雯在诃子活性成分及抑菌作用研究进展中报道，诃子对金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌和志贺氏菌等细菌的感染具有显著的抑制作用。鞣质成分在诃子干燥果实中含量较高，约占 23.6％～37％。鞣质含有多种成分，鞣花酸、诃子酸、安石榴苷均易溶于水；葡萄糖没食子鞣苷易溶于水和乙醇。诃子中的酚酸类物质多数为苯甲酸的衍生物，其中苯甲酸为醇溶性，没食子酸与莽草酸为水溶性，原儿茶酸既溶于水也溶于醇，没食子酸甲酯与没食子酸乙酯则为脂溶性。对于大黄，胡会娟在不同干燥方法对大黄9种活性成分含量的影响研究中报道，大黄主要含有蒽醌类、鞣质类、多糖类等活性成分，现代药理研究表明其具有抗病毒、抗肿瘤、抗动脉粥样硬化、抗真菌和抗过敏、抑制血管增生、促智和泻下等作用。因此，诃子、大黄中酚酸、鞣质在检测中容易存在明显的干扰，不能准确控制产品的质量。