[发明专利]一种用于胚胎干细胞培养的灌流装置及灌流方法在审
申请号: | 202110270074.7 | 申请日: | 2021-03-12 |
公开(公告)号: | CN113150984A | 公开(公告)日: | 2021-07-23 |
发明(设计)人: | 姜胜维 | 申请(专利权)人: | 姜胜维 |
主分类号: | C12M3/00 | 分类号: | C12M3/00;C12M1/04;C12N5/0735 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 200000 上海市静安区云欣路8*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 胚胎 干细胞 培养 灌流 装置 方法 | ||
1.一种用于胚胎干细胞培养的灌流装置,包括支架(1)、限流组件(10)和挤压组件(11),其特征在于:所述支架(1)的顶端固定安装有灌流瓶(2),所述灌流瓶(2)的内壁固定安装有进料管(3),所述灌流瓶(2)的内壁固定安装有出料管(4),所述出料管(4)远离灌流瓶(2)的一端固定安装有灌流箱(5),所述灌流箱(5)的底端固定安装有电动伸缩柱(6),所述灌流箱(5)的左侧固定安装有第一电磁块(7),所述灌流瓶(2)的内壁活动连接有第二电磁块(8),所述第二电磁块(8)远离灌流瓶(2)的一侧固定安装有连杆(9),所述连杆(9)的顶端与限流组件(10)的底端固定连接,所述限流组件(10)的顶端与挤压组件(11)的底端固定连接。
2.根据权利要求1所述的一种用于胚胎干细胞培养的灌流装置,其特征在于:所述限流组件(10)包括底壳(1001),所述底壳(1001)的外壁活动连接有中壳(1002),所述中壳(1002)的内壁活动连接有摆动杆(1003),所述摆动杆(1003)远离中壳(1002)的一端活动连接有转轴(1004),所述转轴(1004)的顶端固定安装有连接杆(1005),所述连接杆(1005)远离转轴(1004)的一端活动连接有第一内圈(1006),所述第一内圈(1006)的内壁固定安装有弯板(1007),所述弯板(1007)的正面活动连接有导杆(1008),所述弯板(1007)的背面固定安装有支撑板(1009)。
3.根据权利要求1所述的一种用于胚胎干细胞培养的灌流装置,其特征在于:所述挤压组件(11)包括顶壳(1101),所述顶壳(1101)的内壁活动连接有转盒(1102),所述转盒(1102)的内壁活动连接有第二内圈(1103),所述第二内圈(1103)的内壁活动连接有挤压板(1104),所述顶壳(1101)的外壁活动连接有转齿(1105),所述转齿(1105)的底端固定安装有螺纹杆(1106),所述螺纹杆(1106)的外壁活动连接有外套管(1107),所述外套管(1107)的内壁活动连接有底柱(1108)。
4.根据权利要求2所述的一种用于胚胎干细胞培养的灌流装置,其特征在于:所述摆动杆(1003)的数量为四个,且每两个摆动杆(1003)为一组,每组摆动杆(1003)均以第一内圈(1006)的水平中心线对称分布。
5.根据权利要求2所述的一种用于胚胎干细胞培养的灌流装置,其特征在于:所述弯板(1007)及其弯板(1007)的所属结构的数量为两个,且两个弯板(1007)及其弯板(1007)的所属结构均以出料管(4)的圆心为中心均匀分布,且导杆(1008)远离第一内圈(1006)的一端固定安装在出料管(4)的外壁。
6.根据权利要求1所述的一种用于胚胎干细胞培养的灌流装置,其特征在于:所述连杆(9)为左右两部分构成,且连杆(9)的左侧部分内壁与出料管(4)的外壁活动连接,连杆(9)的右侧部分通过活动伸缩杆与连杆(9)的右侧部分活动连接,连杆(9)的右侧部分为拉伸柱。
7.根据权利要求3所述的一种用于胚胎干细胞培养的灌流装置,其特征在于:所述螺纹杆(1106)的直径小于底柱(1108)的内径,且底柱(1108)的内壁设置有螺纹凸块。
8.根据权利要求6所述的一种用于胚胎干细胞培养的灌流装置,其特征在于:底柱(1108)的底端与连杆(9)的右侧部分顶端固定连接,且转盒(1102)的内壁设置有凸板,且挤压板(1104)靠近出料管(4)的一侧与出料管(4)的外壁固定连接。
9.根据权利要求1所述的一种用于胚胎干细胞培养的灌流方法,具体如下:
S1、准备工作,准备干细胞培养基,并将干细胞培养基降温至6~15℃;
S2、将干细胞放入容器中,并放置在灌流箱(5)中;
S3、灌流阶段,将干细胞培养基接通进料管(3),并通过出料管(4)进入灌流箱(5)中;
S4、开启灌流箱(5)中的蠕动泵,保持温度在30~36℃;
S5、通氧气,给与灌流瓶(2)通氧,使培养基氧含量达到40~50%;
S6、保持5~7天,保持灌流速度为0.3~1.6RV/天;
S7、放流,在8~10天时,开始放流,并保持其速率为0.1~1RV/天;
S8、完成放流,从灌流箱(5)中取出干细胞,完成干细胞培养。
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