[发明专利]同时检测血液样品中万古霉素与去甲万古霉素的方法、试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种同时检测血液样品中万古霉素与去甲万古霉素的方法，其特征在于，所述方法包括采用高效液相色谱串联质谱法对前处理后的待测样品进行检测；

其中，所述前处理过程包括：

向待测血液样品中加入至甲醇/乙腈的混合液中，震荡离心，将离心后的上清液取出氮吹吹干，流动相复溶后，获得待测上机样品。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述血液样品是血浆或血清，优选为血清。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述甲醇/乙腈的混合液为含有0.01～0.1％(优选为0.05％，w/w)硫酸锌的甲醇与乙腈的混合液；

其中，甲醇与乙腈的体积比为2～3:1～2，优选为3:2。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述HPLC-MS/MS对待测样品进行检测具体方法为：

液相色谱条件包括：

采用梯度洗脱，流动相A相：含0.05～0.5％(优选0.1％)甲酸的水溶液，流动相B相：含0.05～0.5％(优选0.1％)甲酸的甲醇溶液。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，色谱柱为C18色谱柱；流动相流速为200～500μl/min(优选为300μl/min)；柱温为35～45℃(优选为40℃)；进样量1～15μL(优选为10μL)；

优选的，梯度洗脱方式具体为：0～1min，10％流动相B；1.5～3min，95％流动相B；3.5～5min，10％流动相B。

6.如权利要求4所述的方法，其特征在于，质谱条件包括：

离子源：采用正离子电喷雾离子化的多离子反应监测模式，雾化气：60kPa，加热气：50kPa，气帘气：20kPa，喷雾电压：4500V，去溶剂温度：550℃。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检测方法还包括：采用标准品制作标准曲线定量，和采用质控品进行质控。

8.一种同时检测血液样品中万古霉素与去甲万古霉素的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：万古霉素与去甲万古霉的标准品溶液；

含有内标和0.01～0.1％(优选为0.05％，w/w)硫酸锌的甲醇与乙腈的混合液；

其中，甲醇与乙腈的体积比为2～3:1～2，优选为3:2。

含0.05～0.5％(优选0.1％)甲酸的水溶液；

含0.05～0.5％(优选0.1％)甲酸的甲醇溶液。

9.如权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，试剂为色谱纯试剂；

优选的，所述试剂盒还包括质控品，所述质控品由活性炭净化的血清空白样本添加混合药物标准物质制得。

10.权利要求1-7任一项所述同时检测血液样品中万古霉素与去甲万古霉的方法和/或权利要求8或9所述试剂盒在抗生素血药浓度监测中的应用。