[发明专利]一种成纤维细胞的制备及在整形外科修复中的应用

说明书

本发明涉及一种成纤维细胞的制备及在整形外科修复中的应用。本发明发现了一种能够有效的促进成纤维细胞的刺激肽，所述刺激肽在促进成纤维细胞增殖的同时，还能够对与创伤愈合密切相关的TGF‑β1、SOD的表达具有显著的促进作用。通过小鼠伤口愈合实验，也证明了所述的刺激肽具有在动物实验上显著的促进作用，具有较好的应用价值和前景。

技术领域

本申请涉及制药领域，更具体的，涉及一种成纤维细胞的制备及在整形外科修复中的应用。

背景技术

整形外科修复中，最常见的伤害是皮肤受损，皮肤创面修复是一个复杂的生物学过程，涉及创面炎性翻译、肉芽组织增生以及再上皮化等主要过程。成纤维细胞应用于创面总的效应是促进创面修复，主要表现在促进新生肉芽组织生长。成纤维细胞是最主要的修复细胞，是构成肉芽组织的主要成分之一。损伤刺激后，成纤维细胞在趋化因子的作用下进入创口并分裂增殖，与毛细血管及渗出的炎细胞构成肉芽组织。在伤后5～7d 肉芽组织达到高峰，成纤维细胞数量剧增，功能活跃。

成纤维细胞具有分布广泛、取材方便、对机体损伤较小、体外培养容易成活、增殖较快等优点，可进行一般创伤修复和骨创伤修复。现已有专家学者提出成纤维细胞分泌的碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）可增强成纤维细胞的活性。他们认为有针对性地应用生长因子，治疗既可最大限度发挥生长因子本身的生物学作用，同时也会避免或预防许多可能的不良反应，以达到经济与最佳的促修复效果。因此，在临床应用中成纤维细胞可广泛应用于体表创面修复的研究及医疗的其他领域。

近年来，国内外关于胶原蛋白肽的研究极为活跃，因其弱的抗原性和良好的生物相容性，胶原蛋白肽在美容祛皱、保护皮肤、硬组织修复、创面止血等医药卫生领域应用广泛。越来越多的证据表明，在膳食中补充胶原蛋白肽能够促进关节、指甲和毛发中的细胞外基质合成，减少骨质丢失，改善皮肤的屏障功能，修复骨、肌腱损伤。因此，胶原蛋白肽很可能会在伤口愈合过程中起到重要作用。然而，目前关于胶原蛋白肽对创伤愈合作用的研究较少。伤口愈合涉及复杂的生理和生物学机制，包括炎性反应、细胞增殖和创面重塑3个阶段。其中，成纤维细胞不仅在细胞增殖期，而且在整个创面重塑阶段都发挥重要作用。已有研究表明胶原蛋白肽以及鹿茸多肽均能够有效的刺激成纤维细胞的增殖，进而促进伤口的愈合，所述多肽促进效果还不显著，而且在糖尿病伤口的促进方面，也没有相应的研究。

发明内容

本发明克服现有技术的缺陷，提供了一种促进成纤维细胞快速增殖的方法。

一方面，本发明提供了一种促进成纤维细胞增殖的刺激肽，所述刺激肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：1 所示。所述刺激肽是从本公司的肽库中筛选获得的。

在本发明的特定实施例中， 本文所述和提供的多肽包含或由至少90%，91%，92%，93%，94%，95%，96%，97%，98%，99%，99.3%，99.5%，99.7%，99.8%，99.9%或100%的氨基酸组成（对于SEQ ID NO:1:优选至少98%； 对于SEQ ID NO:1:优选至少99.9%或100%），与SEQ IDNO:1的氨基酸序列相似或相同（例如相同）。 例如，本发明的多肽包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列或由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成。

本发明还涉及编码本文所述和提供的本发明多肽的多核苷酸。 在本文中， 编码本发明多肽的的核苷酸序列可以全部具有相同的核苷酸序列或具有不同的序列， 优选地，至少1个氨基酸序列与其它氨基酸序列不同，最优选它们都相差至少一个核苷酸，但是可以（优选地）编码相同的氨基酸序列。 在本发明的一个实施方案中，本发明的多核苷酸编码与SEQ ID NO：1至少80%，85%，90%，91%，92%，93%，94%，95%，96%，97%，98%，99%，99.3%，99.5%，99.7%，99.9%或100%相同的氨基酸序列。

本文描述的是包含至少一种本文重组或合成多肽和治疗性，治疗性皮肤损伤治疗性制剂。