[发明专利]基质样品制备方法及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析方法

说明书

本发明提供一种基质样品制备方法及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析方法，所述基质样品制备方法包括：将HPLC级乙腈和三氟乙酸混合，得到标准溶剂；在所述标准溶剂中加入4‑羟基‑3‑硝基苯甲腈，得到基质溶液；将待测样品制备为样品溶液；将所述样品溶液和所述基质溶液按体积比1:1混合后，得到混合溶液；将所述混合溶液点在靶板上，自然干燥，得到样品靶板。本发明提供的基质适用范围广，不仅适用于小分子化合物和多肽样品的检测，而且适用于蛋白质样品的检测，此外检测时样品制备方法简便，解决了目前使用有机酸基质对低分子量分析物进行MALDI‑TOF质谱时检测受限的问题。

技术领域

本发明涉及化学技术领域，特别涉及一种基质样品制备方法及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析方法。

背景技术

基质辅助激光解吸离子化质谱(Matrix-assisted laser desorptionionization mass spectrometry，MALDI-MS)是20世纪80年代末问世并迅速发展起来的质谱分析技术。这种离子化方式产生的离子常用飞行时间(time offlight，TOF)检测器检测，因此MALDI常与TOF一起称为基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)。MALDI-TOF-MS技术使传统的主要用于小分子物质研究的质谱技术发生了革命性的变革，从此迈入生物质谱技术发展新时代。该技术的特点是采用被称为“软电离”方式，一般产生稳定分子离子，因而是测定生物大分子分子量的有效方法，广泛地运用于生物化学、高分子化学、有机化学、金属有机化学、药学等领域。

MALDI-TOF-MS采用基质(Matrix)当作能量传递的媒介，将基质与被分析物溶液混合后结晶，激光照射结晶时产生气态离子，在电极电场作用下气态离子被引入飞行时间(TOF)质量分析器，不同质荷比的离子到达检测器的时间不同从而进行质荷比的测量。基质在MALDI中的作用在于辅助激光解吸电离被分析物。一般认为基质吸收激光的能量，将能量转换为热能传递给被分析物，并为被分析物提供质子作为电荷的来源。MALDI-TOF中使用基质的优点是使离子化过程更加温和，可产生大部分带单个电荷或者带2～3个电荷的离子，并且通常是质子化或去质子化的完整被分析物，而非被分析物的碎片离子。

目前大部分MALDI-TOF质谱基质为有机酸，如α-氰基-4-羟基肉桂酸(CHCA)、3,5-二甲氧基-4-羟基肉桂酸(SA)等，被广泛应用于分析多肽、蛋白质、核酸和聚合物等。由于上述有机酸基质吸收激光能量时产生碎片离子，在质谱分析的低质量范围内形成大量碎片离子峰，使MALDI-TOF质谱对低分子量分析物的检测受到限制。除此之外，有机酸基质通常适用于某一类分析物的检测，如CHCA适用于多肽样品的检测，SA适用于蛋白质样品的检测，且使用SA时样品制备方法复杂。

发明内容

本发明的目的在于提供一种基质样品制备方法及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析方法，以至少解决目前使用有机酸基质对低分子量分析物进行MALDI-TOF质谱时检测受限的问题。

为解决上述技术问题，本发明提供一种基质样品制备方法，所述基质样品制备方法包括：

将HPLC级乙腈和三氟乙酸混合，得到标准溶剂；

在所述标准溶剂中加入4-羟基-3-硝基苯甲腈，得到基质溶液，其中所述4-羟基-3-硝基苯甲腈的结构式为：

将待测样品制备为样品溶液；

将所述样品溶液和所述基质溶液按体积比1:1混合后，得到混合溶液；

将所述混合溶液点在靶板上，自然干燥，得到样品靶板。

可选的，在所述的基质样品制备方法中，所述标准溶剂中所述HPLC级乙腈和所述三氟乙酸的体积比为100:1～1000:1。