[发明专利]一种植物多糖双水相萃取方法

说明书

本发明公开了一种植物多糖双水相萃取方法，涉及多糖提取领域。使用双水相萃取方法，萃取体系中加入活性保持剂，加入量为步骤2混合物总重量的0.1%~1%；所述活性保持剂含有氯磺酸，混合均匀后进行浸提。通过双水相萃取的方法实现，对植物中的多糖进行提取的效果，另外针对植物中含有的硫酸化多糖，通过复配的活性保持剂的添加在进行提取的过程中，最大程度的保持了硫酸化多糖的活性，提升了提取的多糖作为营养添加剂的生物活性。

技术领域

本发明涉及多糖提取领域，尤其涉及一种植物多糖双水相萃取方法。

背景技术

近二十年来，由于分子生物学的发展，人们逐渐认识到糖及其复合物分子具有极其重要的生物功能，多糖与免疫功能的调节、细胞与细胞的识别、细胞间物质的运输、癌症的诊断与治疗等，都有着密切的关系。多糖具有储藏能量、结构支持和抗原决定性等多种生物功能，多糖及糖结合物的分离，纯化和组分测定及结构分析有了长足进展。同时，对多糖的生物学功能有了新的认识。

大型藻类植物中含有的硫化多糖作为一种硫酸化的多糖，是多糖的糖单元上含有硫酸基。由于硫化多糖具有显著的免疫调节活性，近年来已经成为多糖研究的热点。硫化多糖具有免疫调节的活性，其中的机制包括三个方面：（1）对巨噬细胞功能、NK细胞、T/B淋巴细胞进行调节；（2）激活淋巴细胞的免疫反应；（3）激活补体系统。

传统的提取方法是水提醇沉，水提醇沉的原理是利用某些成分在水和醇中的溶解度差异，加入醇后使其溶解度变小而沉淀，一般来说水提会将药物中的大极性物质都提出来比如多糖、蛋白质、水溶性生物碱、淀粉等。但是传统的方式对含有硫酸根的硫化多糖的活性造成一定的影响。

发明内容

本发明的目的是提供一种植物多糖双水相萃取方法，通过双水相萃取的方法实现，对植物中的多糖进行提取的效果，另外针对植物中含有的硫酸化多糖，通过复配的活性保持剂的添加在进行提取的过程中，最大程度的保持了硫酸化多糖的活性，提升了提取的多糖作为营养添加剂的生物活性。

为实现上述效果，本发明公开了一种植物多糖双水相萃取方法，使用双水相萃取方法，其特征在于所述双水相萃取方法包括如下步骤：

（1）.植物原料粉碎，将植物原料进行破碎至一定细度；

（2）.双液相萃取，配置双水相体系萃取液，将上述步骤粉碎的植物原料加入进行浸提萃取；

（3）.超声搅拌浸提，向步骤2的萃取体系中加入活性保持剂，加入量为步骤2混合物总重量的0.1%~1%；所述活性保持剂含有氯磺酸，混合均匀后进行浸提；

（4）.分离，将萃取完成后的分相溶液进行分离，取上相浸提液，减压浓缩后冷冻干燥获得植物多糖。

进一步的，其中所述活性保持剂为氯磺酸与乙酸按照1：（1~10）重量比例配合后加入十倍重量的水制得。

进一步的，其中原料粉碎后在进行双液相萃取之前还经过脱脂处理，通过丙酮浸泡后烘干实现。

进一步的，其中所述步骤2的双水相体系萃取液和所述植物原料的混合质量比例为100：（20-100）。

进一步的，其中所述步骤3中超声浸提的时间为2-4小时，浸提的温度不超过70℃。

进一步的，其中所述活性保持剂即配即用。

进一步的，其中所述双水相体系萃取液为硫酸铵-乙醇体系的双水相体系萃取液。

进一步的，其中所述步骤4中上相浸提液中加入无水乙醇对无机盐进行分离。

本发明的有益效果在于：

本发明使用双水相萃取的方式，避免了水提醇沉的方法对多糖活性的损害，另外创造性的通过使用复配的含有氯磺酸的活性保持剂，能够进一步对多糖尤其是硫化多糖的活性进行最大化的保持。实现了高效提取植物中多糖的效果。

具体实施方式