[发明专利]一种H基因替换的嵌合麻疹减毒株的构建

说明书

本发明提供了一种H基因替换的嵌合麻疹减毒株的构建方法及其应用。具体地，本发明提供了一种嵌合麻疹病毒减毒株，所述的减毒株是保藏号为CCTCCNO：V202074的麻疹病毒rMV/H(H1a)。本发明还提供了包含所述H基因替换的嵌合麻疹减毒株或其衍生病毒株作为活性成分的疫苗组合物及其制备方法。本发明的嵌合麻疹病毒减毒株，较市面现有的麻疹疫苗株，对流行的H1a基因型麻疹病毒的保护作用更佳。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种H基因替换的嵌合麻疹减毒株及其制备方法和应用。

背景技术

麻疹是由麻疹病毒(Measles Virus，MV)感染引起的急性全身发疹性传染病。麻疹患者在临床上主要的表现特征为发热、眼结膜充血、流涕、咳嗽、皮肤出现斑丘疹及口腔粘膜有麻疹黏膜斑，甚至可能会出现并发症：腹泻、耳聋、失明、脑炎、心肌炎及重度营养不良等。

在麻疹减毒活疫苗研发以前，麻疹是严重危害婴幼儿生命和健康的疾病。随着减毒活疫苗的成功制备，麻疹的发病率被控制在极低的水平。但近十几年来，欧洲、东亚和南亚的很多国家的麻疹发病率反复抬头，不同地区的流行毒株基因型各有不同是比较典型的特点；同时，越来越多出现成人感染麻疹病毒的现象，且，成人的麻疹症状通常都更为严重。

目前唯一上市的麻疹疫苗产品是减毒活疫苗。灭活麻疹疫苗会引起严重的抗体依赖性增强作用。

针对于近十几年麻疹疫情有所反复，科学家开展了长期和系统的研究，目前确认了两个主要的原因，第一，疫苗的接种强度和覆盖度不够；第二，流行毒株的基因型和疫苗株的基因型不匹配。

麻疹对人类的威胁不会立即消失，开展更加深入的研究，开发更加有效的疫苗将对麻疹的控制乃至清除具有重要意义。

近十几年造成全球和我国屡有麻疹局部暴发的可能原因有：(i)疫苗免疫覆盖度不够；(ii)部分人群免疫后的抗体滴度不够高或者抗体衰减过快；(iii)尽管只有一个血清型，但是不同基因型病毒之间不能实现完全的交叉保护，导致当抗体下降以后，可能不再能抵抗其它基因型麻疹病毒的感染。

H蛋白是麻疹病毒的主要免疫原蛋白，含有多个中和表位，且不同的基因型MV的H蛋白的中和表位略有不同；这或许就是不同基因型MV毒株不能实现完全的交叉保护的原因。基于H蛋白的亚单位疫苗可以在体内诱导显著的免疫反应，但是并无上市产品。

因此，本领域迫切需要开发一种有效的、安全性高的预防麻疹病毒的防疫手段。

发明内容

本发明的目的就是提供一种有效的、安全性高的预防麻疹病毒的防疫手段。

在本发明的第一方面，提供了一种嵌合麻疹病毒减毒株，所述的减毒株是保藏号为CCTCC NO：V202074的麻疹病毒rMV/H(H1a)。

在另一优选例中，所述嵌合麻疹病毒减毒株是由野生型A基因型麻疹病毒基因组中的对应于如SEQ ID NO:6所示的H基因序列被替换为如SEQ ID NO:3所示的H1a基因型麻疹病毒H基因的核苷酸序列，所获得的。

在另一优选例中，所述的嵌合麻疹病毒减毒株的基因组中从N基因到L基因具有如SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列。

在本发明的第二方面，提供了一种衍生自如本发明第一方面所述的嵌合麻疹病毒减毒株的衍生病毒株，具有以下一个或多个特性：

(a)高复制能力：复制能力与保藏号为CCTCC NO：V202074的麻疹病毒rMV/H(H1a)的体外复制能力相当；其中，所述复制能力相当是指其复制速率为保藏号为CCTCC NO：V202074的麻疹病毒rMV/H(H1a)的复制速率的≥80％，较佳地≥90％，更佳地≥100％；