[发明专利]一株爬山虎天蛾核型多角体病毒毒株及其增殖方法与应用

说明书

本发明公开了一株爬山虎天蛾核型多角体病毒毒株及其增殖方法与应用，所述的毒株为爬山虎天蛾核型多角体病毒；保藏名称为爬山虎天蛾核型多角体病毒南昌株ThjaNPV‑NC。本发明提高绿色果蔬产量和安全，降低化学农药对环境的污染，保护生态环境。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一株爬山虎天蛾核型多角体病毒毒株及其增殖方法与应用。

背景技术

爬山虎(Parthenocissus tricuspidata)是多种植物的别称。趴山虎、红葡萄藤、巴山虎、捆石龙、枫藤、小虫儿卧草、红丝草、红葛，葡萄科植物。爬山虎的果可酿酒，根茎叶可入药，破瘀血、消肿毒。江西也是中草药大省，对爬山虎中草药的防治也遵循绿色环保、少污染、少残留的方法。

葡萄(Vitis vinifera L.)为葡萄科葡萄属木质藤本植物，是世界上最古老的果树树种之一，在江西省南昌市梅岭等地多有种植，葡萄为著名水果，生食或制葡萄干，并酿酒，酿酒后的酒脚可提酒食酸，根和藤药用能止呕、安胎。现人们生活水平提高，对于果蔬上的农药残留问题特为关注，科学有效的防治果蔬害虫，寻找新型的微生物农药，以替代化学农药的使用，稳定生态环境，一直是有害生物防控研究的重大科学问题。

爬山虎天蛾又称葡萄斜纹天蛾、雀纹天蛾(Thertara jpoinca)，属于鳞翅目、天蛾科。主要寄生植物：葡萄、芋、爬山虎、臭椿、樟树、乌柏等，几乎遍布全国各省，通常危害6月持续至10月，危害特别严重时，植物的叶片几乎殆尽，仅剩下叶脉、枝条等，甚至全株枯死，严重影响了植物的生长及用途。国内外采用敌敌畏乳油、高效氯氰菊酯类、啶虫脒、辛硫磷等等农药防治成本高，对水生动物及人类不安全等缺点，农药超标使果蔬失去食用价值，使农民经济损失巨大，因此，纯生物农药也得到了逐步推广，开发选用新型绿色高效生物制药新品种有效防治害虫显得尤为重要。

昆虫符合农药从传统的有机化学物质向“环境和谐农药”或“生物合理性农药”转化的发展趋势，受到国内外研究者及使用者的青睐。

昆虫核型多角体病毒(nuclear polyhedrosis virus，NPV)属杆状病毒科，主要鳞翅目、双翅目和膜翅目等农林害虫为宿主，具有纯天然、绿色、环保、异性强、不污染环境、对人畜无害的等特点，可开发为安全有效的生物杀虫剂。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的第一目的是提供一种新爬山虎天蛾的核型多角体病毒株及其在防治重要害虫方面的应用，提高绿色果蔬产量和安全，降低化学农药对环境的污染，保护生态环境。

本发明的第二目的是提供本发明的病毒特征。

本发明的第三目的是提供本发明在防治重要害虫方面的应用。

本发明通过如下技术方案实现。

一株爬山虎天蛾核型多角体病毒毒株，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址是中国武汉市武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏日期是2020年9月9日，保藏名称为爬山虎天蛾核型多角体病毒南昌株ThjaNPV-NC，保藏编号为CCTCC NO：V202058。

一种爬山虎天蛾核型多角体病毒的增殖方法，包括如下步骤：

选取三龄或四龄爬山虎天蛾幼虫为增殖宿主，以1×10⁵PIB/mL的爬山虎天蛾核型多角体病毒多角体悬浮液涂抹新鲜乌蔹莓叶片，在27℃，50-70％相对湿度的培养箱中饲养；

喂毒两到三天后，幼虫开始死亡；

每天收集死亡幼虫，直到幼虫全部死亡为止；

幼虫感染爬山虎核型多角体病毒后，虫体液化，流出含有大量病毒多角体颗粒的乳白色液体，将这些乳白色溶液，以800rpm离心3-5min取出昆虫组织残渣后，即得到大量乳白色的病毒粗提液，含有增殖的爬山虎天蛾核型多角体病毒。