[发明专利]一种抗人乳头瘤病毒31型的单克隆中和抗体及其应用

说明书

本发明公开一种抗人乳头瘤病毒31型的单克隆中和抗体，其是人乳头瘤病毒的15价特异性抗体，可用于制备人乳头瘤病毒疫苗、检测或诊断人乳头瘤病毒，以及在制备防治人乳头瘤病毒引起疾病的药物中的应用。

技术领域：

本发明属于生物及医药技术领域，具体涉及抗人乳头瘤病毒31型的单克隆中和抗体及其应用。

背景技术：

人乳头瘤病毒(HPV)是无包膜的双联小DNA病毒，主要侵及人的上皮组织，进而诱发各种良性及恶性增生病变。某些人乳头瘤病毒的型别与宫颈癌、喉癌、膀胱癌、食管癌等上皮恶性肿瘤相关。高危型HPV感染与多种恶性肿瘤的发生相关。HPV感染的流行范围广，所引发的相关致死性的恶性肿瘤对人类健康具有严重的危害性，开发安全有效的预防或治疗性疫苗具有重大意义。目前已经上市的疫苗，价型最多的疫苗为默沙东的9价疫苗(Gardasil 9)，由HPV6、11、16、18、31、33、45、52和58型组成。HPV疫苗的研究发现，体外表达的HPV L1蛋白能够自组装成病毒样颗粒(virus-like particles，VLP)，其结构与天然HPV高度相似，保留了天然病毒的绝大多数中和表位，可诱导高滴度的中和抗体。

在HPV疫苗研发过程中，至少需要开展四个方面的测定，即工艺过程样含量检测、型别鉴定实验、抗原含量检测和体外效力检测。其方法均可以采用双抗体夹心法ELISA。而体外效力检测要求至少有一株中和抗体用于ELISA法检测，因此，单克隆抗体是疫苗研制过程中的重要工具，尤其是具有特异性和中和活性的抗体具有不可替代的作用。除此以外，利用中和抗体开发的抗体药，还可以应用于乳头瘤病毒引起的相关疾病的治疗作用。

在疫苗研发过程中，体外效力的检测，用双抗体夹心法ELISA法检测，对所使用的抗体的要求，除了其中一个配对抗体是中和抗体以外，还必须要求具有特异性，因为多价疫苗，是多种HPV混合在一起的，要对每种HPV进行体外效力的测定，首先就必须能够特异性的检测到目的蛋白。目前已经上市的最多价型是9价，个别报道已经开展临床的有14价疫苗，但目前还未有文献报道更高价如15价特异的抗体。除了中和活性和特异性是必须的以外，作为体外效力检测用到的抗体，抗体识别的抗原表位最好是中和活性的优势表位，体外效力才有更佳的代表疫苗活力的意义。

发明内容：

针对现有技术的需求和不足，本发明人通过研究获得的抗人乳头瘤病毒31型的单克隆中和抗体，其是15价特异抗体，且具有中和优势表位，因而提出本发明。

本发明人提供一种抗人乳头瘤病毒31型的单克隆中和抗体，其重链中：CDR1序列为：DYAMH；CDR2序列为：VMSTYYDDANYNQKFKG；CDR3序列为：GPLYGNYVDYSMDY；且其轻链中，CDR1序列为：KSSQSLLDSDGKTYLN；CDR2序列为：LVSKLDS；CDR3序列为：QGTHFPRT；

或者其重链中：CDR1序列为：GYGVN；CDR2序列为：MIWGDGSTDYNSAL；CDR3序列为：GGSSYYYAMDY；且其轻链中，CDR1序列为：RASENIYSYLA；CDR2序列为：NAKTLAE；CDR3序列为：QHHYGTPLT。

优选地，所述单克隆中和抗体其重链全长氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；其轻链的全长氨基酸序列如SEQ ID NO：7所示；或者其重链全长氨基酸序列如SEQ ID NO：12所示；其轻链的全长氨基酸序列如SEQ ID NO：17所示。

更优选地，所述单克隆中和抗体，分别由单克隆抗体细胞株HPV31 19B4和HPV3119C2产生的，其中，单克隆抗体细胞株HPV31 19B4和HPV31 19C2已于2020年12月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号分别为CGMCC No.21416和CGMCC No.21417。

本发明还提供编码所述的单克隆中和抗体的多核苷酸。

进一步提供一种核酸表达载体，包括编码所述的多核苷酸。