[发明专利]一种用于单细胞凝胶电泳实验的操作装置及操作方法在审

专利信息
申请号: 202110255536.8 申请日: 2021-03-09
公开(公告)号: CN113029732A 公开(公告)日: 2021-06-25
发明(设计)人: 彭菁珒;彭方园;李海普;杨兆光;骆文宝 申请(专利权)人: 中南大学
主分类号: G01N1/30 分类号: G01N1/30;G01N1/31;G01N27/447
代理公司: 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 代理人: 郑萌萌
地址: 410083 湖南省*** 国省代码: 湖南;43
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摘要:
搜索关键词: 一种 用于 单细胞 凝胶电泳 实验 操作 装置 操作方法
【说明书】:

发明公开一种用于单细胞凝胶电泳实验的操作装置及操作方法,涉及生物实验技术领域,包括操作盒、载片、密封盖和支撑组件,操作盒包括盒体和盒盖,盒盖用于盖设于盒体上,盒体底部设置有排液口,密封盖用于安装于排液口上,且密封盖设置于盒体外侧,支撑组件设置于盒体的内壁上,载片包括孔板和多个盛装筒,多个盛装筒间隔设置于孔板上,孔板用于安装于支撑组件上。本发明中的用于单细胞凝胶电泳实验的操作装置及操作方法能够用于除电泳外的所有实验环节,具有使用简单、操作简便、利于批量实验、增加了实验准确度、可重复利用、经济节约等优点,降低实验造成的生物危害,便于推广使用,有助于规范简便地检测细胞DNA损伤。

技术领域

本发明涉及生物实验技术领域,特别是涉及一种用于单细胞凝胶电泳实验的操作装置及操作方法。

背景技术

单细胞凝胶电泳(single cell electrophoresis assay,SCGE)是一种可检测单个细胞DNA损伤情况的技术,因其检测的细胞DNA在荧光显微镜下的成像类似于彗星,又被称为“彗星实验”。单细胞凝胶电泳技术先把分散的单细胞固定于凝胶中,进而通过细胞裂解液的作用使得细胞膜和核膜等生物膜被分解,细胞中的RNA及蛋白质等小分子物质会进入裂解液中。而细胞核中的DNA属于大分子物质,会停留在原位。待裂解完成后,进行电泳时,受损的DNA会解璇成大小不一的片段,由于大小片段受电场力影响时,迁移速度不同而形成的拖尾现象。在电泳结束后,可用荧光染料将DNA进行染色处理,在荧光显微镜下可观察到类似彗星的现象。该实验通常将待测细胞制成一定浓度的细胞混合液,通过正常熔点琼脂糖和低熔点琼脂糖搭载细胞悬液铺于载玻片上,再在黑暗环境下进行裂解、电泳、染色。通过荧光显微镜拍摄细胞核的拖尾图像,最后运用彗星图像分析软件进行数据分析后,判断细胞DNA损伤程度。其是在单细胞水平上灵敏检测DNA损伤和修复的常用方法。

目前单细胞凝胶电泳实验存在以下问题:

1.目前常用载片主要分为磨砂载玻片和普通玻璃载玻片。磨砂载玻片最主要的缺点是荧光显微照像时,所能拍摄的拖尾图像清晰程度低,难以用于后续的数据分析。普通玻璃载玻片最主要的缺点是制得的凝胶厚度不均匀,经常面临脱胶问题。

2.目前常用载片可承载样本量少,不方便取放,在面临大规模样品时,需要多次取放,实验过程难以保持多次实验条件一致,导致实验平行性差。

3.目前常用载玻片在铺设多个凝胶样本时,存在放置盖玻片后凝胶溢出,相邻样品间可能产生污染,同时,掀开盖玻片时容易带动凝胶或相邻盖玻片,增大脱胶概率。

4.目前实验中常用的细胞裂解液及荧光染料具有毒性,需对其进行回收处理,而目前缺乏相应的专用回收装置。

5.目前市场上售卖的试剂盒价格昂贵,普适性不强。

发明内容

为解决以上技术问题,本发明提供一种用于单细胞凝胶电泳实验的操作装置及操作方法,操作简便,利于批量实验,增加了实验准确度,可重复利用,降低实验造成的生物危害,便于推广使用。

为实现上述目的,本发明提供了如下方案:

本发明提供一种用于单细胞凝胶电泳实验的操作装置,包括操作盒、载片、密封盖和支撑组件,所述操作盒包括盒体和盒盖,所述盒盖用于盖设于所述盒体上,所述盒体底部设置有排液口,所述密封盖用于安装于所述排液口上,且所述密封盖设置于所述盒体外侧,所述支撑组件设置于所述盒体的内壁上,所述载片包括孔板和多个盛装筒,多个所述盛装筒间隔设置于所述孔板上,所述孔板用于安装于所述支撑组件上。

优选地,所述支撑组件包括两个可折叠挂钩,两个所述可折叠挂钩对称设置于所述盒体的两个内壁上,所述孔板两端对称设置有两个条形孔,一个条形孔用于安装于一个所述可折叠挂钩上。

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