[发明专利]用于非侵入性检测肝毒性吡咯里西啶类生物碱暴露的生物标志物和方法

权利要求书

1.用于体外检测目标对象中吡咯里西啶生物碱暴露的方法，所述方法包括：

(i)测量从所述目标对象中获得的生物样品(例如尿液样品)中的吡咯-氨基酸加合物的浓度或量；

(ii)将测量的所述吡咯-氨基酸加合物的浓度或量与参比对照的浓度或量进行比较；以及

(iii)当测量的所述样品中的所述吡咯-氨基酸加合物的浓度或量高于所述参比对照的浓度或量时，则认为检测到所述目标对象中的吡咯里西啶生物碱暴露。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述吡咯-氨基酸加合物为吡咯里西啶生物碱代谢物。

3.如权利要求1至2中任一项所述的方法，其中所述吡咯-氨基酸加合物是根据通式I的化合物：

或其异构体，其中：

X和Y独立地选自-OH和氨基酸，条件是X和Y中的至少一个为氨基酸；以及

每个氨基酸独立地选自组氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、精氨酸、丙氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸和酪氨酸。

4.如权利要求3所述的方法，其中所述吡咯-氨基酸加合物的每个氨基酸通过所述氨基酸的α-碳上的氨基和/或通过所述氨基酸的侧链连接。

5.如权利要求3至4中任一项所述的方法，其中所述吡咯-氨基酸加合物的每个氨基酸独立地选自通式IIa、通式IIb和式IIc：

或其异构体，其中：

每个Z独立地选自-H和-C(＝O)CH₃；以及

每个R为独立地选自组氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、精氨酸、丙氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸和酪氨酸的氨基酸的侧链。

6.如权利要求3或权利要求5所述的方法，其中所述吡咯-氨基酸加合物是具有选自以下的结构式的化合物或其异构体：

及它们的组合。

7.如权利要求5所述的方法，其中所述吡咯-氨基酸加合物的每个氨基酸独立地选自通式IIIa和通式IIIb：

或其异构体，其中：

每个Z独立地选自-H和-C(＝O)CH₃；

每个R¹为独立地选自组氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、精氨酸、丙氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸和酪氨酸的氨基酸的侧链；以及

每个R²为独立地选自组氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、精氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺和色氨酸的氨基酸的侧链；

优选地，每个R¹和R²为独立地选自组氨酸、半胱氨酸和赖氨酸的氨基酸的侧链。

8.如权利要求7所述的方法，其中通式IIIb的每个Z为-H；并且所述吡咯-氨基酸加合物为具有选自以下的结构式的化合物或其异构体：

及它们的组合；或者

通式IIIb的至少一个Z为-C(＝O)CH₃；并且所述吡咯-氨基酸加合物是具有选自以下的结构式的化合物或其异构体：

及它们的组合；

优选地，每个R¹和R²为独立地选自组氨酸、半胱氨酸和赖氨酸的氨基酸的侧链。