[发明专利]以甲基橙生物降解溶液测定水中铜离子(II)浓度的方法

权利要求书

1.一种以甲基橙生物降解溶液测定水中铜离子（II）浓度的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将甲基橙粉末溶解于去离子水中，得到甲基橙母液；将其加入到矿物盐培养基中，得到甲基橙浓度为100~500 mg/L的混合液一；在LB培养基中培养无致病性的Shewanella oneidensis MR-1菌液，然后以厌氧矿物盐培养基洗菌、重悬，经稀释得到菌液；将菌液加至混合液一中，得到混合液二；

控制稀释菌液的加入量，使混合液二的OD₆₀₀为0.1~0.5；向混合液二中添加乳酸，使其所含乳酸浓度为0.045~0.060 mol/L；然后置于摇床中，在30℃和150 转/分钟条件下进行甲基橙的降解反应；当反应体系的颜色呈无色时结束反应，将反应液离心除菌，得到甲基橙生物降解溶液，密封保存备用；

所述矿物盐培养基是厌氧矿物盐培养基，其配方包括以下组分：Na₂HPO₄ 3.4638 g/L，NaH₂PO₄1.8717g/L，K₂HPO₄ 0.225g/L，KH₂PO₄ 0.225 g/L，(NH₄)₂SO₄ 0.255g/L，MgSO₄·7H₂O0.024 g/L，NaCl 0.46 g/L，次氮基三乙酸1.5g/L，MgSO4·7H₂O 3g/L，MnSO₄·2H₂O 0.5g/L，NaCl 1g/L，FeSO₄·7H₂O 0.1g/L，CoSO₄ 0.1g/L，CaCl₂·2H₂O 0.1g/L，ZnSO₄ 0.1g/L，CuSO₄·5H₂O 0.01g/L，AlK(SO₄)₂ 0.01g/L，H₃BO₃ 0.01g/L，Na₂MoO₄·2H₂O 0.01g/L，余量是去离子水；

（2）绘制标准曲线：

取50μL甲基橙生物降解溶液于离心管中，加入已知浓度的铜离子（II）溶液2.5 mL，混合均匀后在室温下静置5~10 min；分别在波长为514 nm、552 nm处测量吸光值，得到铜离子（II）浓度与波长吸光度呈线性关系的标准曲线；

（3）测定待测水样中铜离子（II）的浓度：

取50μL甲基橙生物降解溶液于离心管中，加入待测水样2.5 mL，混合均匀后在室温下静置5~10 min；分别在波长为514 nm、552 nm处测量吸光值，对照标准曲线获得铜离子（II）浓度；对两组浓度数据求平均值，获得的结果即为待测水样中的铜离子（II）浓度。