[发明专利]二次柱层析制备高纯度黑米花青素的工艺及所用的专用层析装置

说明书

本发明公开了二次柱层析制备高纯度黑米花青素的工艺及所用的专用层析柱装置，工艺是以花青素含量10‑25％的普通市售黑米提取物为原料，经过200目的聚酰胺树脂柱层析纯化、解吸液浓缩以及喷雾干燥制备高纯度黑米花青素干粉。本发明的工艺及专用层析柱装置能够实现把花青素含量10‑25％的普通市售低纯度黑米提取物进一步纯化精制得到花青素含量30‑60％的高纯度黑米花青素。

技术领域

本发明涉及一种黑米提取物经过二次柱层析进一步纯化得到高纯度黑米花青素的制备方法，属天然植物提取技术领域。

背景技术

黑米是由禾本科植物稻经长期培育形成的一类特色品种，黑米为米中珍品，素有“贡米”、“药米”、“长寿米”之美誉，具有特殊的营养价值。黑米的营养价值和药用价值都比较高，在《本草纲目》中记载：有滋阴补肾、健脾暖肝、明目活血的功效。用它入药，对头昏、贫血、白发、眼疾等疗效甚佳。

黑米的颜色之所以与其他米不同，主要是因为它外部的皮层中含有花青素这种天然植物色素，这种色素本身具有很强的抗衰老作用。黑米皮中的总黄酮物质主要是由黑米花青素组成。

花青素是自然界一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素，也是植物花瓣中的主要呈色物质，水果、蔬菜、花卉等五彩缤纷的颜色大部分与之有关，它广泛存在于黑米、蓝莓、越橘、紫甘蓝等植物中，是一种具有一定营养和药理作用的纯天然食用色素，可以抵抗因人体自由基引起的多种相关疾病。花青素的养生保健功效在国际上早已家喻户晓，被称为“软黄金”。在欧美等西方国家的美容界，花青素被称为“青春营养品”、“口服化妆品”，它的抗氧化性、消除自由基的功效已被广泛应用。

黑米中含有大量的花青素，黑米提取物的标志性成份就是黑米花青素，目前国内生产制造业生产的黑米提取物中花青素含量一般为10-25％，个别厂家能做到黑米花青素纯度接近30％，关于黑米提取物提取方法既有水提、醇提也有酶解法，超临界法等等，但纯化精制方法基本是以大孔树脂柱层析纯化为主，当黑米提取物作为保健功能食品原料或在医药、化妆品领域添加使用时，花青素的纯度至关重要，欧美发达国家在食品、医药领域使用的花青素原料一般纯度都是35％以上，因此，提供一种适合规模化生产的高纯度黑米花青素制备方法具有实用性和现实指导意义。可以预见高纯度黑米花青素在保健食品领域、医药领域以及天然植物提取物出口贸易领域应用前景极其广阔。

发明内容

本发明的目的是提供一种二次柱层析制备高纯度黑米花青素的工艺及所用的专用层析装置。本发明以普通市售黑米提取物(花青素含量10-25％)为原料，经过聚酰胺柱层析纯化、解吸液浓缩以及喷雾干燥制备高纯度黑米花青素干粉。

二次柱层析制备高纯度黑米花青素的工艺，包括以下步骤：

1、上柱液预处理：按重量份数计，市售黑米提取物原料的花青素含量 10-25％，称取10-15份市售黑米提取物原料，用100份盐酸水溶液在30-60℃条件下充分搅拌溶解，采用的盐酸水溶液体积比浓度为2％。

2、解吸液配制：配制体积比为60％的乙醇溶液，加入2％V/V的盐酸。

3、采用层析柱装置，控制上柱液、水洗液、解吸液的压力保持高位且恒定，用高压穿透力保障料液稳定顺利透过层析柱的聚酰胺树脂；

4、上柱吸附：将料液储罐12中预处理完毕的上柱液通过层析柱装置的吸附、解吸回路由层析柱147中的聚酰胺树脂进行吸附，上柱压力设置为5～7 公斤，流速控制在每小时2-2.5个柱体积。

5、水洗：吸附完毕后，将料液储罐12中的水洗液通过层析柱装置的吸附、解吸回路对层析柱147中的聚酰胺树脂进行水洗，上柱压力设置为7～9 公斤，流速控制在每小时3-4个柱体积，水洗至洗脱液澄清。

6、解吸：水洗完毕后，将料液储罐12中的解吸液通过层析柱装置的吸附、解吸回路对层析柱147中的聚酰胺树脂进行解吸，解吸液上柱压力设置为5～7公斤，流速控制在每小时2.5-3个柱体积，得到高纯度黑米花青素解吸液。