[发明专利]一种单细胞测序筛选软骨细胞标记分子的方法在审
申请号: | 202110249055.6 | 申请日: | 2021-03-08 |
公开(公告)号: | CN112852919A | 公开(公告)日: | 2021-05-28 |
发明(设计)人: | 于腾波;陈进利;赵海波;赵夏;姜弘元;王天瑞;马金龙;孙泽文;于承浩;李天予;韩增帅 | 申请(专利权)人: | 青岛大学附属医院 |
主分类号: | C12Q1/6811 | 分类号: | C12Q1/6811 |
代理公司: | 北京挺立专利事务所(普通合伙) 11265 | 代理人: | 王莉 |
地址: | 266003 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 单细胞 筛选 软骨 细胞 标记 分子 方法 | ||
1.一种单细胞测序筛选软骨细胞标记分子的方法,其特征在于:包括以下步骤:
1)提取软骨组织;
2)分离单细胞并进行裂解:分离单细胞,加入裂解缓冲液中进行裂解,得到细胞裂解液;
3)对样品的mRNA进行逆转录得到cDNA:使用美国ThermoFisher公司的SuperScript试剂盒构建逆转录体系,对上述步骤2)获得的细胞裂解液进行逆转录,得到cDNA;
4)以cDNA为模板进行PCR扩增,构建测序文库,进行测序:使用美国Illumina公司的NexteraXT试剂盒,对上述步骤3)得到的逆转录产物进行扩增和纯化,构建高通量测序文库;完成后将文库送交测序;
5)对测序结果进行生物信息学分析,寻找软骨细胞特异性的标记分子。
2.根据权利要求1所述单细胞测序筛选软骨细胞标记分子的方法,其特征在于:所述步骤1)中,将从软骨组织中提取的软骨细胞进行单细胞测序,从mRNA水平上寻找软骨细胞特异性的标记分子。
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