[发明专利]一种单细胞测序筛选软骨细胞标记分子的方法在审

专利信息
申请号: 202110249055.6 申请日: 2021-03-08
公开(公告)号: CN112852919A 公开(公告)日: 2021-05-28
发明(设计)人: 于腾波;陈进利;赵海波;赵夏;姜弘元;王天瑞;马金龙;孙泽文;于承浩;李天予;韩增帅 申请(专利权)人: 青岛大学附属医院
主分类号: C12Q1/6811 分类号: C12Q1/6811
代理公司: 北京挺立专利事务所(普通合伙) 11265 代理人: 王莉
地址: 266003 *** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 单细胞 筛选 软骨 细胞 标记 分子 方法
【权利要求书】:

1.一种单细胞测序筛选软骨细胞标记分子的方法,其特征在于:包括以下步骤:

1)提取软骨组织;

2)分离单细胞并进行裂解:分离单细胞,加入裂解缓冲液中进行裂解,得到细胞裂解液;

3)对样品的mRNA进行逆转录得到cDNA:使用美国ThermoFisher公司的SuperScript试剂盒构建逆转录体系,对上述步骤2)获得的细胞裂解液进行逆转录,得到cDNA;

4)以cDNA为模板进行PCR扩增,构建测序文库,进行测序:使用美国Illumina公司的NexteraXT试剂盒,对上述步骤3)得到的逆转录产物进行扩增和纯化,构建高通量测序文库;完成后将文库送交测序;

5)对测序结果进行生物信息学分析,寻找软骨细胞特异性的标记分子。

2.根据权利要求1所述单细胞测序筛选软骨细胞标记分子的方法,其特征在于:所述步骤1)中,将从软骨组织中提取的软骨细胞进行单细胞测序,从mRNA水平上寻找软骨细胞特异性的标记分子。

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