[发明专利]一种高效液相色谱串联质谱检测血清中脂溶性维生素的样品前处理方法

权利要求书

1.一种用于血清中脂溶性维生素提取的蛋白沉淀剂，其特征在于，包括甲醇、乙腈和异丙醇。

2.如权利要求1所述的蛋白沉淀剂，其特征在于，还包括添加剂，所述添加剂为甲酸、氟化铵、甲酸铵、乙酸铵、2,6-二叔丁基对甲酚中的任意一种或多种。

3.如权利要求1所述的蛋白沉淀剂，其特征在于，所述添加剂为乙酸铵。

4.如权利要求2所述的蛋白沉淀剂，其特征在于，所述甲醇、乙腈和异丙醇的体积比为5～75％:5～75％:5～75％，所述乙酸铵的含量为10～50mM。

5.如权利要求3所述的蛋白沉淀剂，其特征在于，所述甲醇、乙腈和异丙醇的体积比为70～75％:15～25％:5～10％，所述乙酸铵的含量为40～50mM。

6.一种用于血清中脂溶性维生素提取的内标溶液，其特征在于，包含内标准品工作液和权利要求1-5任一项所述的蛋白沉淀剂；所述内标准品工作液包含待测脂溶性维生素内标。

7.如权利要求5所述的内标溶液，其特征在于，所述内标准品工作液与蛋白沉淀剂的体积比为1:124。

8.一种高效液相色谱串联质谱检测血清中脂溶性维生素的样品前处理方法，其特征在于，采用如权利要求1～5任一项所述的蛋白沉淀剂或如权利要求6或7所述的内标溶液进行样品前处理，其中样品与蛋白沉淀剂或内标溶液的体积比为1:3～1:7。

9.如权利要求7所述的样品前处理方法，其特征在于，包括步骤1)：取50μL样品至96孔板，加入250μL内标溶液涡旋混匀，600rpm震荡10min，离心分离，取上清液200μL于低吸附96孔板中，待测；

或包括步骤2)：取50μL样品至96孔板，加入2μL内标准品工作液，再加入248μL蛋白沉淀剂，涡旋混匀，600rpm震荡10min，离心分离，取上清液200μL于低吸附96孔板中，待测。

10.乙酸铵用于制备蛋白沉淀剂的用途，其特征在于，所述蛋白沉淀剂用于高效液相色谱串联质谱检测血清中脂溶性维生素的样品前处理，所述脂溶性维生素为维生素A、维生素E、维生素K1、维生素K2中的一种或多种。