[发明专利]一种南药穿心莲的组培快繁方法

说明书

本发明公开了一种南药穿心莲的组培快繁方法，具体涉及穿心莲培养技术领域，包括以下步骤：步骤一、选取制作培养基质的材料；步骤二、制备培养基质；步骤三、选取穿心莲种子；步骤四、制备灭菌溶液。本发明向培养皿中添加活性炭和砂土，以提高培养皿中培养基的透气性，从而能够提高培养基中的氧气含量，以促进穿心莲植株的呼吸，利用搅拌棒对培养皿中的MS培养基、琼脂、赤霉素、蔗糖和苯乙酸进行充分地搅拌，并在搅拌的过程中不停地振动培养皿，使得培养皿中的不同成分能够充分地混合，而且振动培养皿还能够将该混合物均匀地平铺在培养皿的内部，以保证培养皿中每个区域的营养成分相同，使得穿心莲种子能够正常的生根发芽。

技术领域

本发明实施例涉及穿心莲培养技术领域，具体涉及一种南药穿心莲的组培快繁方法。

背景技术

穿心莲是我国传统的中药材，在初秋茎叶茂盛时采割地上部分，晒于，全草可入药。穿心莲叶片的主要成分是二萜内酯化合物，而根主要含黄酮类化合物以及甾醇和生物碱等。现代研究较多的是叶片中的内酯类化合物，包括穿心莲内酯、新穿心莲内酯和去氧穿心莲内酯等，其中穿心莲内酯含量最高。穿心莲因为具有抗炎，抗病毒，抗肿瘤，抗心血管疾病这四抗和解热解毒等多方面作用而有很高的临床药用和保健价值。其四抗作用逐渐引起国内外药学界的重视，研究人员正在筛选以穿心莲内酯为主要构架的新药，并进一步研究这些新药的作用机制。目前市场上出现的穿心莲注射液等中成药都是以穿心莲为主要原料的。这些药具有清热解毒，凉血消肿之用，可以治疗风热感冒、发炎等多种病症。

穿心莲以种子繁殖为常规繁殖方式，即育苗移栽法或直播法、育苗移栽法为主。具体方法为分批采摘9～10月间的褐色穿心莲果实，用罩子盖住种子，放在通风荫凉处后熟几日，等果荚全部裂开后，筛除果皮，获得种子。穿心莲种子不仅细小，而且种皮较坚硬，外层包有蜡质，不容易通水透气，需要较高的播种技术。因此，在播种前需要对种子进行一系列的预处理，先用砂或细砂纸磨去种子外层的蜡质，再放在30℃的温箱中催芽，然后才能播种。这种常规的种子繁殖育苗法特别费时，从预处理到出苗定植要1个多月，而且播种时发芽率不高，出苗不一致，难以满足工厂化大质退化以及种质混杂、药用成分含量下降等问题。因此，应该采用组培快繁手段，在短期内培育出大量整齐一致的试管苗，解决穿心莲传统繁殖存在的这些问题，有利于穿心莲优良植株性状的保持与推广，同时为穿心莲多倍体育种以提高有效药用成分打下良好基础。

所以现代化的穿心莲的培养多是利用培养皿对穿心莲的组织进行培养，以获得更多高质量的穿心莲，但是穿心莲在培养的过程中由于采用固体培养基，很容易造成培养皿内部养分分布不均、通气性较差的问题，从而容易影响穿心莲种子的正常生根发芽。

发明内容

为此，本发明实施例提供一种南药穿心莲的组培快繁方法，通过向培养皿中添加活性炭和砂土，以提高培养皿中培养基的透气性，从而能够提高培养基中的氧气含量，以促进穿心莲植株的呼吸，并通过向培养皿中添加萘乙酸，促进诱导穿心莲植株愈伤组织的分化，从而能够促进穿心莲植株的发育和培养，利用搅拌棒对培养皿中的MS培养基、琼脂、赤霉素、蔗糖和苯乙酸进行充分地搅拌，并在搅拌的过程中不停地振动培养皿，使得培养皿中的不同成分能够充分地混合，而且振动培养皿还能够将该混合物均匀地平铺在培养皿的内部，以保证培养皿中每个区域的营养成分相同，使得穿心莲种子能够正常的生根发芽。

为了实现上述目的，本发明实施例提供如下技术方案：一种南药穿心莲的组培快繁方法，包括以下步骤：

步骤一、选取制作培养基质的材料，选取的基质材料有MS培养基60-90份、赤霉素5-20份、蔗糖30-45份、琼脂5-8份、萘乙酸5-20份、活性炭10-40份和砂土10-25份；

步骤二、制备培养基质；

步骤三、选取穿心莲种子；

步骤四、制备灭菌溶液，向无菌烧杯中添加蒸馏水和次氯酸钠并搅拌；

步骤五、对穿心莲种子进行灭菌处理，需要将选取的穿心莲种子放置在次氯酸钠溶液中进行灭菌处理，浸泡8分钟；