[发明专利]一种紫果西番莲种苗的培育方法

说明书

本发明公开了一种紫果西番莲种苗的培育方法，包括如下步骤：(1)对紫果西番莲种子进行种皮处理，分别用未稀释过的硫酸以及80％的硫酸对西番莲种子进行浸泡；(2)计算种胚的发芽率；(3)将无菌叶片取下接入到不同浓度配比的生长素和细胞分裂素的MS培养基中进行培养，定期对分化情况进行记录统计；(4)定期对无菌苗生根情况进行数据统计记录；(5)统计成活率。本发明在紫果西番莲离体快繁体系的建立上，既缩短了培育时间，又简化了培育的步骤，并且能够为建立在离体快繁体系上进行的紫果西番莲多倍体研究实验提供大量无菌苗。

技术领域

本发明涉及高效苗木培育的技术领域，具体涉及一种紫果西番莲种苗的培育方法。

背景技术

西番莲是典型的热带、亚热带浆果，原产南美洲的巴西至阿根廷一带，目前在台湾、福建、广东、广西以及云南等地均有种植。西番莲的果汁具有浓郁独特的香味，具有多种水果的风味，所以有“水果之王”的美誉，且营养价值很高，其根、茎、叶、花等均有较大的药用价值，其种子还可以利用机械压榨法和溶剂萃取抽提法得到澄清、无异味且品质优良的实用油。

目前西番莲用于食用栽培的主要有紫果西番莲、黄果西番莲以及杂交品种，种质资源相对缺乏、适应范围较窄，主要的繁殖方法是有性繁殖和无性繁殖，有性繁殖主要是种子繁殖，用种子繁殖出来的实生苗木，虽然根系较强大，抗逆性较强，但存在营养生长偏旺，开花结果较少、较迟，变异较大，产量不稳定，果实大小不均匀，果实内可溶性固形物含量降低，风味变差，香味变淡以及出汁率变低等问题，致使市场上优质种苗缺口很大，供不应求，进而制约了西番莲种植业和加工业的发展。所以通过无性繁殖可以一定程度上避免实生苗育种出现的问题，并且在无性繁殖的基础上，通过诱变处理苗木的方法探究多倍体育种，对西番莲的发展应用前景具有重要意义。

西番莲无性繁殖主要通过扦插、嫁接以及组织培养，其中组织培养通过直接培养种胚可以获得无菌苗，但是西番莲的种皮十分坚硬，直接培养发芽时间较长，所以通过硫酸对种皮进行前期处理，使种皮变薄再人工去壳，放入未添加任何激素的MS培养基内，发芽时间缩短至3d，可以短时间内获得大量的无菌苗，并且对无菌叶片进行组织培养，可以在较短时间内分化出大量丛生芽，为建立紫果西番莲高效离体快繁体系以及在此基础上进行多倍体诱导研究建立了良好的前期基础。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，而提供了一种简单方便的紫果西番莲种苗的培育方法。

为了解决现有技术的问题，本发明提供了如下技术方案：本发明的一种紫果西番莲种苗的培育方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)对紫果西番莲种子进行种皮处理，分别用未稀释过的硫酸以及80％的硫酸对西番莲种子进行浸泡；

(2)将处理过的种子无菌条件下去壳接种在未添加任何激素的MS培养基内进行培养，接种后每天统计种胚发芽情况，计算种胚的发芽率；

(3)将无菌叶片取下接入到不同浓度配比的生长素和细胞分裂素的MS培养基中进行培养，定期对分化情况进行记录统计；

(4)将长到一定高度的分化得到的无菌苗壮苗一段时间后接入不浓度配比的生长素的1/2MS培养基内进行生根培养，定期对无菌苗生根情况进行数据统计记录；

(5)将生根的无菌苗移至正常室内炼苗，然后配置不同成分的基质，对生根苗进行移栽，统计成活率。

进一步地，在步骤(1)中，种子浸泡的温度为常温。

进一步地，在步骤(2)中，无菌苗培养、叶片分化和生根：对培养基进行高温高压灭菌前将pH值调至5.8-6.0，培养温度为25±2℃，光照时间12h/d，光照强度2000-3000lx。

更进一步地，在步骤(2)中，所述的发芽指标采用以下公式计算：发芽率(％)＝n/N×100％；式中，n为测定时间内正常发芽的种子数；N为每个处理的种子数。