[发明专利]一种比率型荧光检测系统及其检测方法及应用

说明书

本发明公开一种比率型荧光检测系统及其检测方法及应用，其系统包括遮光暗室，及设置于遮光暗室内的检测板、荧光检测模块、激发光源模块和MCU系统；所述检测板上设置有用于放置荧光探针和试剂的检测槽，所述激发光源正对检测槽；所述荧光检测模块包括两组，每组均包括滤光片和光电传感器；所述MCU系统的输出端与激发光源模块连接，MCU系统的输入端与荧光检测模块连接，激发光源模块的输出光经荧光探针受激后发射的荧光再经滤光片过滤后射入光电传感器中。本发明采用比率型荧光探针具有自参比特性，对检测环境要求不再苛刻，可有效避免来自环境的干扰，检测精度高，并且可很大程度减少系统误差、抗干扰能力极强。

技术领域

本发明涉及生物检测领域技术领域，具体涉及一种比率型荧光检测系统及其检测方法及其应用。

背景技术

在目前的医学领域中，根据荧光检测原理对人体内物质检测已经日益成熟，目前大多数检测手段都是根据被检测物质具有荧光特性或者是通过荧光能量共振转移原理。该技术可具体描述为：通过被检测物质具有的荧光特性，在某特定波长的激发光照射下发射出比激发光波长更长的光，称为荧光；荧光强度(F)与激发光强度(I0)及荧光物质浓度(C)之间的关系为：F＝2.3QKI0εCl，F＝KC，Q为量子产率，K为荧光效率，ε为摩尔吸光系数，l为光径长度。荧光共振能量转移是一种非辐射能量跃迁，通过分子间的电偶极相互作用，将供体激发态能量转移到受体激发态的过程，使供体荧光强度降低，而受体可以发射更强于本身的特征荧光(敏化荧光)，也可以不发荧光(荧光猝灭)，通过在过程中发生的荧光强度变化和所检测物质的浓度存在一定的线性关系。

如授权公告号为CN107917905B的中国发明专利，公开了一种基于智能终端的比率型光度分析装置及方法，装置包括智能终端和光学辅助装置，所述光学辅助装置包括避光暗盒，避光暗盒内设置有连排双光度测量池，测量池背对检测器的外壁镀有或粘贴反射膜增强光信号，所述连排双光度测量池接收光源发出的光，样品溶液和参比溶液两个通道的光学图像信号依次经过滤光机构、聚光机构后被智能终端采集，测定其中的红、绿和蓝三原色的平均亮度，计算其亮度比，实现光度分析。上述方案的检测依赖于光亮度来进行分析，对激发光源的要求比较苛刻，并且由于环境光、激发光源散热等等问题的存在，会影响其检测精度。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种可有效避免来自环境的干扰，且检测精度高的比率型荧光检测系统及其检测方法及应用。

为解决上述技术问题，本发明公开了一种比率型荧光检测系统，包括遮光暗室，及设置于遮光暗室内的检测板、荧光检测模块、激发光源模块和MCU系统；所述检测板上设置有用于放置荧光探针和试剂的检测槽，所述激发光源模块正对检测槽；所述荧光检测模块包括两组，每组均包括滤光片和光电传感器，2片滤光片为中心波长不同的滤光片；所述MCU系统的输出端与激发光源模块连接，MCU系统的输入端与荧光检测模块连接，激发光源模块的输出光经荧光探针受激后发射的荧光再经滤光片过滤后射入光电传感器中。

为了方便更换荧光探针和试剂，优选的，所述检测板可里外移动的设置于遮光暗室内。

优选的，上述方案还包括显示单元，MCU系统的输出端与显示单元连接。

优选的，上述方案还包括上位机，MCU系统的输出端与上位机连接。

优选的，所述激发光源模块包括依次连接的恒流源、LED激发光源和耦合单元。

本发明还公开了一种比率型荧光检测系统的检测方法，包括以下步骤：

(1)拟合相关性曲线

①准备同种试剂不同浓度梯度的标准液，用于数据拟合；

②打开系统总开关，使得系统其他各个模块工作，之后打开激发光源模块开关，等待激发光源模块稳定；