[发明专利]提升灵芝菌三萜化合物的光生物反应器及藻菌共生体系的构建方法

说明书

本发明公开了一种提升灵芝菌三萜化合物的光生物反应器及藻菌共生体系的构建方法，所述光生物反应器内设置隔挡膜，隔挡膜将光生物反应器分为第一培养箱和第二培养箱，第一培养箱用于培养蛋白核小球藻，第二培养箱用于培养灵芝菌，隔挡膜用于防止蛋白核小球藻细胞体和灵芝菌细胞体产生黏连和胶黏。采用光生物反应器构建藻菌共生体系的方法包括S1：将蛋白核小球藻细胞接种于第一培养箱内的PDB培养基；S2：将灵芝菌细胞接种于第二培养箱内的PDB培养基；S3：将蛋白核小球藻细菌和灵芝菌细胞接种后的光生物反应器置于恒温恒光的无菌室，温度设置为28‑30℃，光照强度设置为130μmol/m²/s‑150μmol/m²/s，培养10‑15天。本发明的藻菌共生体系对灵芝菌的三萜化合物的提升具有显著的效果。

技术领域

本发明属于生物医药技术制造领域，尤其涉及一种提升灵芝菌三萜化合物的光生物反应器及用光生物反应器提升三萜化合物含量的藻菌共生体系构建方法。

背景技术

抗肿瘤药物的研发一直是生物医药技术的研究热点，天然抗癌物质具有毒副作用小的巨大优势。三萜类化合物是一种典型的活性抗癌物质，而灵芝菌(Ganoderma lucidum)能够产生大量的三萜化合物，因此如何提升灵芝菌的三萜化合物含量成为备受关注的热点。目前，灵芝菌产生三萜类化合物产量的提升依然是这种活性抗癌物质提取的技术瓶颈之一。

发明内容

本发明提供一种提升灵芝菌三萜化合物的光生物反应器及藻菌共生体系的构建方法，本发明的藻菌共生体系对灵芝菌培养体系中三萜类化合物的提升具有显著的效果。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

一种提升灵芝菌三萜化合物含量的光生物反应器，所述光生物反应器内设置隔挡膜，所述隔挡膜将所述光生物反应器分为第一培养箱和第二培养箱，第一培养箱用于培养蛋白核小球藻，第二培养箱用于培养灵芝菌，所述隔挡膜用于防止蛋白核小球藻细胞体和灵芝菌细胞体产生黏连和胶黏，但是细胞体之外的活性物质可以正常透过隔挡膜。

优选地，所述隔挡膜为孔径为0.22μm的水相聚醚砜膜。

优选地，所述光生物反应器长25cm、宽15cm、高15cm。

一种提升灵芝菌三萜化合物含量的藻菌共生体系构建方法，体系构建采用权利要求1-3任意一项所述的提升灵芝菌三萜化合物含量的光生物反应器，包括以下步骤：

S1：将5-10mL浓度为1×10⁵cell/mL-5×10⁵cell/mL的蛋白核小球藻接种于第一培养箱内的PDB培养基；

S2：将5-10mL浓度为1×10⁵CFU/mL-5×10⁵CFU/mL的灵芝菌接种于第二培养箱内的PDB培养基；

S3：将蛋白核小球藻细菌和灵芝菌接种后的光生物反应器置于恒温恒光的无菌室，温度设置为28-30℃，光照强度设置为130μmol/m²/s-150μmol/m²/s，培养10-15天；

其中步骤S1和S2不分先后顺序。

优选地，所述步骤S1中浓度为1×10⁵cell/mL-5×10⁵cell/mL的灵芝菌的具体培养为将处于对数期的蛋白核小球藻接种于PDB培养基中，进行无菌培养，培养3-5代，直至蛋白核小球藻细胞浓度达到1×10⁵cell/mL-5×10⁵cell/mL时用于藻菌共生体系的构建。