[发明专利]一种用于高效处理高盐有机麦草畏废水的混合光合细菌菌种的培养方法

权利要求书

1.一种用于高效处理高盐有机麦草畏废水的混合光合细菌菌种的培养方法，其特征在于包括以下步骤：

S1混合光合细菌菌种的初始培养：取海水、高盐有机麦草畏废水好氧处理系统中的活性污泥以及河道底泥按照1 : 0.5~1.5 : 0.5~1.5的体积比混合配制得到待培养样品，然后按照体积分数1%~2%的接种量转移到高盐有机麦草畏废水培养基A中，在温度30~35℃、在光照强度2000-3500 Lx下进行培养，当观察培养基A有红色出现，且培养液的颜色由浅红变为深红或深紫色，同时培养液的形态转变为粘稠状液体时，即初始培养结束；

S2混合光合细菌菌种的富集培养：取步骤S1初始培养结束后的粘稠状液体按照体积分数0.5%~1%的接种量转移到高盐有机麦草畏废水培养基A中，按照与步骤S1相同的步骤进行培养，培养结束后，即完成一次富集培养；重复操作1~3次，共富集培养2~4次；

S3混合光合细菌菌种的分离培养：取步骤S2最后一次培养结束后的富集液用蒸馏水稀释80-120倍，稀释液涂布到平板上，待平板上稀释液晾干后，再向平板上加入分离培养基B，然后在厌氧环境下于光照强度2000-3500 Lx下进行静置培养，直到有红色菌落长出；挑取红色菌落多次划线进行分离纯化，分离出单菌落；

S4混合光合细菌菌种的活化培养：挑选所述单菌落接种于液体培养基C中进行活化培养，当液体培养基C的颜色由浅红变为深红或深紫色，且液体培养基C的形态转变为粘稠状液体时，即培养结束；

S5混合光合细菌菌种的扩大培养：以步骤S4培养结束后的粘稠状液体为生产菌液，将其接种至含有放大培养基D的生物反应器中逐级放大培养，逐级放大培养采用敞开式的培养方法，在培养条件不变的情况下，直至培养得到含有所需要数量混合光合细菌菌种的菌液。

2.如权利要求1所述的一种用于高效处理高盐有机麦草畏废水的混合光合细菌菌种的培养方法，其特征在于步骤S1中，高盐有机麦草畏废水培养基A的COD值在5000-6000mg/L，含盐浓度在1-5%。

3.如权利要求1所述的一种用于高效处理高盐有机麦草畏废水的混合光合细菌菌种的培养方法，其特征在于步骤S3中，所述分离培养基B包括：醋酸钠3g/L，磷酸二氢钾1g/L，磷酸氢二钾1g/L，无水氯化钙0.01g/L，无水硫酸镁0.2g/L，氯化钠30g/L，pH 7.0-7.5，121℃，灭菌时间20 min。

4.如权利要求1所述的一种用于高效处理高盐有机麦草畏废水的混合光合细菌菌种的培养方法，其特征在于步骤S4中，所述液体培养基C包括：醋酸钠3g/L，磷酸二氢钾1g/L，磷酸氢二钾1g/L，无水氯化钙0.01g/L，无水硫酸镁0.2g/L，氯化钠30g/L，pH 7.0-7.5，121℃，灭菌时间20 min。

5.如权利要求1所述的一种用于高效处理高盐有机麦草畏废水的混合光合细菌菌种的培养方法，其特征在于步骤S5中，所述放大培养基D包括：醋酸钠10g/L，磷酸二氢钾1g/L，磷酸氢二钾1g/L，无水氯化钙0.01g/L，无水硫酸镁0.2g/L，氯化钠10g/L，pH 6.0-7.5, 121℃，灭菌时间20 min。

6.如权利要求1所述的一种用于高效处理高盐有机麦草畏废水的混合光合细菌菌种的培养方法，其特征在于步骤S1中，所述活性污泥以及河道底泥的含水率均在93-98%之间。

7.如权利要求1所述的一种用于高效处理高盐有机麦草畏废水的混合光合细菌菌种的培养方法，其特征在于步骤S4培养后所得菌液中主要包括球形红假单胞菌和粪红假单胞菌两种混合光合细菌菌种，球形红假单胞菌和粪红假单胞菌在整个所述菌液的菌群中所占的数量比重为70%以上。

8.如权利要求1所述的一种用于高效处理高盐有机麦草畏废水的混合光合细菌菌种的培养方法，其特征在于步骤S5中，最终培养所得菌液中主要包括球形红假单胞菌和粪红假单胞菌两种混合光合细菌菌种，球形红假单胞菌和粪红假单胞菌两者在菌液中的总浓度为10^10-12 CFU/mL。