[发明专利]雷帕霉素在制备治疗中耳炎药物中的应用

说明书

本发明公开了雷帕霉素在制备治疗中耳炎药物中的应用，属于医药技术领域。雷帕霉素可减轻中耳炎炎症和听力损失，降低自噬体蛋白LC3‑II和自噬底物蛋白p62的积累，治疗效果显著；并且其无肾毒性，在研发治疗中耳炎的药物方面具有广阔前景。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，更具体的说是涉及雷帕霉素在制备治疗中耳炎药物中的应用。

背景技术

中耳炎(Otitis medium,OM)为累及中耳(包括咽鼓管、鼓室、鼓窦及乳突气房)全部或部分结构的炎性病变，是临床上最常见的儿童疾病之一，可导致颅内外严重的并发症。OM的发病机制与免疫系统功能障碍、遗传易感性、病原体暴露、咽鼓管功能障碍等多种因素有关，确切发病机制目前尚不清楚。

雷帕霉素(RPM)是一种新型大环内酯类免疫抑制剂，无肾毒性，毒副作用小，可抗真菌、抑制肿瘤生长，也可通过不同的细胞因子受体阻断信号传导，阻断T淋巴细胞及其他细胞由G1期至S期的进程，从而发挥免疫抑制效应，用于治疗器官移植的排斥反应。

目前尚无使用雷帕霉素治疗中耳炎的相关报道。

发明内容

有鉴于此，本发明首次提出了雷帕霉素在制备治疗中耳炎药物中的应用。

Toll样受体2(Tlr2)参与OM炎症的启动和清除；如无Tlr2的参与，会加重炎症反应，延长疾病病程。本发明通过鼓膜穿刺将链球菌肽聚糖多糖(PGPS)接种到Tlr2tm1Kir(Tlr2^-/-)小鼠(敲除Tlr2基因)中耳，构建成OM小鼠模型；与野生型(WT)小鼠相比，接种PGPS的OM小鼠能够表现出严重而持久的炎症和组织损伤，其所表现出OM症状相对稳定，为药物筛选和研究预防和治疗机制提供了较长的时间窗口。

对OM小鼠施用RPM，经(听觉脑干反应)ABR和鼓室测量以及中耳组织学分析，RPM能够减轻OM炎症症状，并能够挽救听力损失。

进一步研究其作用机制，发现PGPS诱导的OM小鼠发生自噬降解功能障碍(LC3-II和p62蛋白累积增加)，而RPM治疗减轻了自噬降解功能障碍；因此，RPM的治疗作用可能与调节mTORC1和/或自噬活性有关。

进一步地，以雷帕霉素为药效成分制备治疗中耳炎的药物，还可添加药学上可接受的辅料。

有益效果：雷帕霉素可减轻中耳炎炎症和听力损失，降低自噬体蛋白LC3-II和自噬底物蛋白p62的积累，治疗效果显著；并且其无肾毒性，在研发治疗中耳炎的药物方面具有广阔前景。

附图说明

图1所示为各组ABR波形图；

图2所示为各组ABR阈值；

图3所示为各组I波潜伏期；

图4所示为各组HE染色图；

图5所示为各组小鼠中耳(ME)内炎症细胞相对覆盖面积；

图6所示为各组免疫组化染色图；图中EC为中耳上皮；

图7所示为各组western blot条带；

图8所示为各组蛋白积累量。

具体实施方式

下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例

1.OM小鼠模型构建与RPM治疗