[发明专利]海洋巨大芽孢杆菌、微生物肥料及发酵液和应用

说明书

本发明涉及微生物技术领域，特别是涉及一株海洋巨大芽孢杆菌及其发酵液和应用，以及一种微生物肥料。该海洋巨大芽孢杆菌已于2019年6月3日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No.17890；保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。该海洋巨大芽孢杆菌具有促进植物生长和活化土壤固定磷、钾养分的作用，并且和枯草芽孢杆菌之间亲和性良好，定殖能力强，从而能够发挥改良土壤、促进植物生长的作用。以该海洋巨大芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌制成的微生物肥料可以有效改良土壤质量并促进植物生长。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，特别是涉及一株海洋巨大芽孢杆菌及其发酵液和应用，以及一种微生物肥料。

背景技术

在农业上，土壤质量的好坏是影响农作物健康生长的重要条件之一。然而，化学肥料的过量施用会引起土壤微生物种群数量降低、土质板结、地力贫瘠等问题发生，造成农作物的产量和质量下降。近年来，微生物菌剂作为一种高效绿色环保的生物肥料，在改善土壤微生物多样性、提高土壤养分、促进植物生长等方面发挥了重要的作用。

芽孢杆菌是一类好氧兼厌氧的产芽孢的革兰氏阳性杆菌，能够产生对不利条件具有特殊抵抗力的芽孢，是研制微生物菌剂应用最多的菌属。芽孢杆菌可在土壤中存活、定殖和繁殖，在土壤中不仅具有解磷固氮、重寄生、诱导植物产生抗性的作用，还可以产生抑制有害病菌生长的拮抗物质，有利于土壤有益微生物的富集，从而缓解因大量使用化肥农药所带来的土壤质量问题，对促进农作物生长、提高作物品质具有积极影响。

但是对于陆地生态系统来说，由于多年重复筛选，造成筛选出具有良好功能的菌种的频率逐年降低，从而造成菌株缺乏。并且，有些芽孢杆菌在实验室表现出良好的平板拮抗效果，用于土壤中时却因定殖情况较差而不能发挥相应的作用。另外，功能微生物组合能够增加微生物肥料应用效果的稳定性，将芽孢杆菌用于制备菌剂时，菌种之间可能存在拮抗作用，同样影响其作用的发挥。

发明内容

针对以上技术问题，本发明提供一株从渤海底泥中分离获得的海洋巨大芽孢杆菌及其发酵液和应用，以及一种微生物肥料。该海洋巨大芽孢杆菌具有促进植物生长和活化土壤固定磷、钾养分的作用，定殖能力强，且与枯草芽孢杆菌具有良好的亲和力，生长时无抑制作用，二者复合后协同增效，具有良好的改良土壤和促进植物生长的作用。

为解决上述技术问题，本发明实施例采用了如下的技术方案：

一方面，本发明实施例提供一株海洋巨大芽孢杆菌，其分类名称为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)，于2019年6月3日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No.17890；保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

本发明所提供的海洋巨大芽孢杆菌从渤海底泥样品中分离得到，属于芽孢杆菌属。该海洋巨大芽孢杆菌具有促生、解磷和解钾的作用，并且和枯草芽孢杆菌之间亲和性良好，定殖能力强，在土壤中存活28天时有效菌数可达到0.2×10⁸～0.6×10⁸cfu/g，从而能够达到改良土壤、促进植物生长的作用。以该海洋巨大芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌制成微生物肥料可以有效改良土壤质量并促进植物生长。该海洋巨大芽孢杆菌的16S rDNA序列如SEQID NO.1所示。

该海洋巨大芽孢杆菌的筛选方法具体包括以下步骤：

①采取我国渤海湾沧州海域的海洋底泥样品，采用无机磷海水细菌培养基(葡萄糖：10.0g，硫酸铵：0.5g，氯化钠：0.3g，硫酸镁：0.3g，硫酸锰：0.03g，硫酸亚铁：0.03g，磷酸钙：5.0g，酵母浸粉：0.5g，氯化钾：0.3g，琼脂：15.0g，海水：1000mL，pH7.2±0.2，121℃灭菌20min后使用)，利用稀释涂平板的方法进行海洋底泥样品的分离。将涂布的平板在28℃培养箱中培养，待平板长出菌落后，挑取周围有透明圈的菌落，采用划线分离法进行3次分离纯化，初步获得具有解磷性能的海洋细菌；