[发明专利]一种固相萃取包及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种固相萃取包及其制备方法和应用，涉及化学检测技术领域。本发明固相萃取包由固相萃取剂与盐析萃取包组成，其中固相萃取剂为采用了一步水热法、丙烯酸改性和低温氧化协同聚合反应合成的聚苯胺@碳微球。该固相萃取包能够用于根及根茎、果实种子、花、皮、菌藻五种药用部位的46种中药材中的真菌毒素样品前处理，具有简单快速、高效省力、成本低廉、环境友好等优点。同时，结合同位素内标‑超高效液相色谱串联质谱法(UPLC‑MS/MS)高通量在线检测，可以检测出中药材中常见的16种真菌毒素，精确度好、灵敏度高、检出限低、回收率高，可以很好地用于中药材中真菌毒素检测，具有良好的市场应用前景。

技术领域

本发明属于化学检测技术领域，涉及一种固相萃取包及其制备方法和应用。

背景技术

我国中药材资源丰富，中药文化历史悠久，中药及其制剂广泛用于治疗多种疾病。据世界卫生组织(WHO)统计，目前在全世界大约有40亿人在使用中药材防病治病。但迄今为止，中药材出口贸易尚未占据国际医药市场主导地位，中药材走向国际市场，国际上更多关注的是我国中药材生产工艺、质量标准和安全性能等因素。尤其是近年来，外源性有害物质真菌毒素(Foodborne Mycotoxins，FMs)等影响中药材安全性的这一主要危害因素的存在，造成了国际上对中药材的安全有效、质量可控等环节的质疑。由于真菌毒素是产毒真菌在生长过程中产生的次级代谢产物，广泛存在于各类中药材中，具有致癌、致畸、致突变和肝脏、生殖、造血系统损伤等毒性作用，因此WTO已将真菌毒素中的黄曲霉毒素B₁(AFB₁)定为一类致癌物。我国对中药材的质量检测与控制方法也不断更新，2020年最新修订的《2020版药典通则》建立了以黄曲霉毒素为主的若干种常见真菌毒素的检测方法——超高效液相色谱串联质谱法(UPLC/MS)，并被《中华人民共和国药典》2020年版采纳为最终判定方法。

中药走出国门，质量标准和安全风险必须符合国际规范，但是中药材种类繁多，数量庞大，逐一建立中药材外源性有害物质的检验检测分析方法工作量巨大、成本极高。目前，寻找简单、快速、绿色、高效的前处理方法与高通量、多组分、同时在线快速测定新技术用于系统研究中药真菌毒素分析检测工作迫在眉睫。

在检验检测方法上，简单快速固相萃取前处理——超高效液相色谱质谱分析联用技术凭借其简单快捷、高效准确等独特技术优势，在过去十年间发展迅猛，并在中药检测领域取得巨大研究进展。目前实验室常用的前处理方法为有机溶剂直提法、商品化的SPE固相萃取柱和QuEChERS萃取剂(包)。其中直提法的有机溶剂一般包括甲醇、乙腈、乙醇、乙酸等；固相萃取柱包括HLB柱、专用免疫亲和柱等；萃取剂(包)一般是固定质量配比下的石墨碳黑、PSA、C₁₈、氧化铝Al-N等中的一种或几种，结合氯化钠、硫酸钠或硫酸镁等中的一种或几种。例如，胡佳哲等人以甲醇-甲酸-水为提取液测定了中药材中8种真菌毒素(胡佳哲,吴凤丹,陈俏,赖宇红,陈浩桉.同位素标记-高效液相色谱-串联质谱法测定中药材中8种真菌毒素[J].中国卫生检验杂志,2020,30(5):513-517.)；陈勇等人利用HLB多功能净化柱检测了中药材三七中的10种真菌毒素(陈勇,陈重均,李劲,栾连军,刘雪松,吴永江.超高效液相色谱串联质谱法检测三七药材中10种真菌毒素[J].2015(050),001:81-85.)；梁晟等人利用乙酸钠-硫酸镁分散固相萃取联合专用免疫亲和柱进行苍耳子中展青霉素的含量测定(梁晟,邱婧,李瑞莲,潘震宇.UPLC-MS/MS法检测苍耳子中的展青霉素[J].2018,33(4):393-395.)。